CAJ | 학술논문

目的:研究炎症介质——脂多糖(LPS)是否通过扰乱固醇调节元件结合蛋白裂解激活蛋白-固醇调节元件结合蛋白2(SCAP-SREBP2)复合物介导的低密度脂蛋白受体(LDLr)负反馈调控,增加人血管平滑肌细胞对天然低密度脂蛋白胆固醇(LDL)摄取,导致泡沫细胞形成.方法:人血管平滑肌细胞在无血清培养基中培养24 h后,分为对照组(继续无血清培养);高脂组(加入LDL负荷,终浓度为25 μg/ml);高脂加LPS组(加入LDL负荷,终浓度为25μg/ml,同时加入LPS,终浓度400 ng/ml);高脂加LPS加肝素组(加入LDL负荷,终浓度为25 μg/ml,加入LPS,终浓度400 ng/ml,加入肝素,终浓度5mg/ml),以上各组细胞培养24 h后收获.酶化学法检测细胞内胆固醇浓度,油红O染色法检测细胞内脂质水平,Real time PCR法检测LDLr、SREBP2表达水平,细胞免疫化学法检测SCAP蛋白表达,激光共聚焦检测SCAP在内质网与高尔基体间的转位情况.结果:细胞内胆固醇测定及油红O染色发现,LPS通过增加人血管平滑肌细胞对非修饰LDL摄取,导致人血管平滑肌细胞转变为泡沫细胞.在LPS不存在时,25 μg/ml LDL减少LDLr mRNA水平(P＜0.05).然而,LPS增加LDLr mRNA水平,逆转25 μg/ml LDL对LDLr的抑制效应,不恰当的增加了血管平滑肌细胞对LDL摄取(P＜0.05),LPS刺激也导致了SCAP蛋白表达增加和SREBP2的mRNA水平升高(P＜0.05),同时促进了SCAP从内质网转移到高尔基体.这些结果提示LPS通过增加SCAP/SREBP2复合物从内质网到高尔基体转位,干扰了胆固醇介导的LDLr负反馈调控,使非修饰LDL在血管平滑肌细胞内堆积,导致泡沫细胞形成.结论:本研究提示,在LPS刺激条件下,SCAP/SREBP2/LDLr通路可能是血管平滑肌细胞泡沫化的另一条通路.
목적:연구염증개질——지다당(LPS)시부통과우란고순조절원건결합단백렬해격활단백-고순조절원건결합단백2(SCAP-SREBP2)복합물개도적저밀도지단백수체(LDLr)부반궤조공,증가인혈관평활기세포대천연저밀도지단백담고순(LDL)섭취,도치포말세포형성.방법:인혈관평활기세포재무혈청배양기중배양24 h후,분위대조조(계속무혈청배양);고지조(가입LDL부하,종농도위25 μg/ml);고지가LPS조(가입LDL부하,종농도위25μg/ml,동시가입LPS,종농도400 ng/ml);고지가LPS가간소조(가입LDL부하,종농도위25 μg/ml,가입LPS,종농도400 ng/ml,가입간소,종농도5mg/ml),이상각조세포배양24 h후수획.매화학법검측세포내담고순농도,유홍O염색법검측세포내지질수평,Real time PCR법검측LDLr、SREBP2표체수평,세포면역화학법검측SCAP단백표체,격광공취초검측SCAP재내질망여고이기체간적전위정황.결과:세포내담고순측정급유홍O염색발현,LPS통과증가인혈관평활기세포대비수식LDL섭취,도치인혈관평활기세포전변위포말세포.재LPS불존재시,25 μg/ml LDL감소LDLr mRNA수평(P＜0.05).연이,LPS증가LDLr mRNA수평,역전25 μg/ml LDL대LDLr적억제효응,불흡당적증가료혈관평활기세포대LDL섭취(P＜0.05),LPS자격야도치료SCAP단백표체증가화SREBP2적mRNA수평승고(P＜0.05),동시촉진료SCAP종내질망전이도고이기체.저사결과제시LPS통과증가SCAP/SREBP2복합물종내질망도고이기체전위,간우료담고순개도적LDLr부반궤조공,사비수식LDL재혈관평활기세포내퇴적,도치포말세포형성.결론:본연구제시,재LPS자격조건하,SCAP/SREBP2/LDLr통로가능시혈관평활기세포포말화적령일조통로.