解剖学报
解剖學報
해부학보
ACTA ANATOMICA SINICA
2014年
5期
656-662
,共7页
王莉%姜宝华%钱忠明%段相林
王莉%薑寶華%錢忠明%段相林
왕리%강보화%전충명%단상림
二价金属离子转运体%金属转运蛋白%原代培养%巨噬细胞%小鼠
二價金屬離子轉運體%金屬轉運蛋白%原代培養%巨噬細胞%小鼠
이개금속리자전운체%금속전운단백%원대배양%거서세포%소서
Divalent metal transporter 1%Ferroportin 1%Primary culture%Macrophage%Mouse
目的:检测二价金属离子转运体(DMT1)和金属转运蛋白(FPN1)在原代培养巨噬细胞中的分布及脂多糖( LPS)对巨噬细胞铁代谢的影响。方法采用原代细胞培养、MTT显色、细胞化学染色和细胞免疫荧光等方法检测LPS对原代培养的巨噬细胞活性的作用及对DMT1和FPN1分布的影响。结果不带铁反应元件的二价金属离子转运体( DMT1-IRE)主要在细胞核中表达,在细胞质中分布较少。带铁反应元件的二价金属离子转运体( DMT1+IRE)主要分布于细胞质中,可以将吞噬小体中的铁向细胞质中转运。 FPN1在巨噬细胞的细胞质和细胞膜均有表达,但主要分布于细胞质。结论巨噬细胞吞噬衰老的红细胞以后,其中的亚铁血红素在细胞质中分解, FPN1可能介导了亚铁血红素分解释放出来的铁在巨噬细胞质中的转运过程。 LPS在低浓度时有促进巨噬细胞生长的作用,LPS浓度为10-5μg/L时达到高峰,随着浓度的增加,又开始抑制细胞生长。
目的:檢測二價金屬離子轉運體(DMT1)和金屬轉運蛋白(FPN1)在原代培養巨噬細胞中的分佈及脂多糖( LPS)對巨噬細胞鐵代謝的影響。方法採用原代細胞培養、MTT顯色、細胞化學染色和細胞免疫熒光等方法檢測LPS對原代培養的巨噬細胞活性的作用及對DMT1和FPN1分佈的影響。結果不帶鐵反應元件的二價金屬離子轉運體( DMT1-IRE)主要在細胞覈中錶達,在細胞質中分佈較少。帶鐵反應元件的二價金屬離子轉運體( DMT1+IRE)主要分佈于細胞質中,可以將吞噬小體中的鐵嚮細胞質中轉運。 FPN1在巨噬細胞的細胞質和細胞膜均有錶達,但主要分佈于細胞質。結論巨噬細胞吞噬衰老的紅細胞以後,其中的亞鐵血紅素在細胞質中分解, FPN1可能介導瞭亞鐵血紅素分解釋放齣來的鐵在巨噬細胞質中的轉運過程。 LPS在低濃度時有促進巨噬細胞生長的作用,LPS濃度為10-5μg/L時達到高峰,隨著濃度的增加,又開始抑製細胞生長。
목적:검측이개금속리자전운체(DMT1)화금속전운단백(FPN1)재원대배양거서세포중적분포급지다당( LPS)대거서세포철대사적영향。방법채용원대세포배양、MTT현색、세포화학염색화세포면역형광등방법검측LPS대원대배양적거서세포활성적작용급대DMT1화FPN1분포적영향。결과불대철반응원건적이개금속리자전운체( DMT1-IRE)주요재세포핵중표체,재세포질중분포교소。대철반응원건적이개금속리자전운체( DMT1+IRE)주요분포우세포질중,가이장탄서소체중적철향세포질중전운。 FPN1재거서세포적세포질화세포막균유표체,단주요분포우세포질。결론거서세포탄서쇠로적홍세포이후,기중적아철혈홍소재세포질중분해, FPN1가능개도료아철혈홍소분해석방출래적철재거서세포질중적전운과정。 LPS재저농도시유촉진거서세포생장적작용,LPS농도위10-5μg/L시체도고봉,수착농도적증가,우개시억제세포생장。
Objective To study the effect of lipopolysaccharide ( LPS ) on the activity of primary cultured macrophages and the distribution of divalent metal transporter 1 ( DMT1 ) and ferroportin 1 ( FPN1 ) .Methods Primary cell culture , MTT chromotest , cytochemistry chromotest and cell immunofluorescence techniques were used in this work . Results DMT1 was mainly distributed in the cytoplasm , which illuminates that DMT1 mediates the macrophage intracellular transit of iron from phagolysosome to cytoplasm .FPN1 was distributed in the cytoplasm and membrane , and the cytoplasm was the main site of FPN 1 distribution in macrophages .Conclusion Iron liberation from heme inside the phagolysosome occurs after erythrophagocytosis and it is possible that FPN 1 mediates intracellular transit of iron released by heme catabolism .The study found that LPS promoted the cell growth and this effect was reached to the peak in the 10 -5μg/L LPS group, but the cell growth was blocked with the increase of LPS concentration .