水产养殖
水產養殖
수산양식
2014年
10期
1-7
,共7页
丁东%熊云%方勇新%林标扬
丁東%熊雲%方勇新%林標颺
정동%웅운%방용신%림표양
对虾%白斑综合征病毒%传染性皮下和造血器官坏死病毒%PCR%胶体金免疫赏析%同步检测
對蝦%白斑綜閤徵病毒%傳染性皮下和造血器官壞死病毒%PCR%膠體金免疫賞析%同步檢測
대하%백반종합정병독%전염성피하화조혈기관배사병독%PCR%효체금면역상석%동보검측
为了快速、方便地检测出这2种病毒,研究将PCR核酸扩增的高灵敏度和胶体金免疫层析技术快速、简便、直观的优点结合起来,建立了同时检测2种对虾病毒(WSSV和IHHNV)的同步PCR-胶体金免疫层析检测方法.采用了生物素标记和地高辛(Digoxigenin)标记引物.PCR扩增产物利用胶体金免疫层析技术进行检测.胶体金免疫检测试剂条的检测线(T线)处的层析膜处点上地高辛的单抗,经地高辛标记的PCR扩增产物可在T线上被检测到,在10 min内即可得到检测结果.同时,在PCR过程中使用UNG(尿嘧啶-DNA糖基酶),极大地控制了遗留污染.通过此方法检测对虾WSSV和IHHNV病毒的灵敏度均可达到10～100个拷贝,高于国家标准PCR检测法10～100倍.此检测方法让工作人员避免了接触有毒和诱导突变的试剂,免除基层检测实验室购买电泳设备和荧光检测系统的投资.
為瞭快速、方便地檢測齣這2種病毒,研究將PCR覈痠擴增的高靈敏度和膠體金免疫層析技術快速、簡便、直觀的優點結閤起來,建立瞭同時檢測2種對蝦病毒(WSSV和IHHNV)的同步PCR-膠體金免疫層析檢測方法.採用瞭生物素標記和地高辛(Digoxigenin)標記引物.PCR擴增產物利用膠體金免疫層析技術進行檢測.膠體金免疫檢測試劑條的檢測線(T線)處的層析膜處點上地高辛的單抗,經地高辛標記的PCR擴增產物可在T線上被檢測到,在10 min內即可得到檢測結果.同時,在PCR過程中使用UNG(尿嘧啶-DNA糖基酶),極大地控製瞭遺留汙染.通過此方法檢測對蝦WSSV和IHHNV病毒的靈敏度均可達到10～100箇拷貝,高于國傢標準PCR檢測法10～100倍.此檢測方法讓工作人員避免瞭接觸有毒和誘導突變的試劑,免除基層檢測實驗室購買電泳設備和熒光檢測繫統的投資.
위료쾌속、방편지검측출저2충병독,연구장PCR핵산확증적고령민도화효체금면역층석기술쾌속、간편、직관적우점결합기래,건립료동시검측2충대하병독(WSSV화IHHNV)적동보PCR-효체금면역층석검측방법.채용료생물소표기화지고신(Digoxigenin)표기인물.PCR확증산물이용효체금면역층석기술진행검측.효체금면역검측시제조적검측선(T선)처적층석막처점상지고신적단항,경지고신표기적PCR확증산물가재T선상피검측도,재10 min내즉가득도검측결과.동시,재PCR과정중사용UNG(뇨밀정-DNA당기매),겁대지공제료유류오염.통과차방법검측대하WSSV화IHHNV병독적령민도균가체도10～100개고패,고우국가표준PCR검측법10～100배.차검측방법양공작인원피면료접촉유독화유도돌변적시제,면제기층검측실험실구매전영설비화형광검측계통적투자.
