解放军医学院学报
解放軍醫學院學報
해방군의학원학보
Academic Journal of Chinese Pla Medical School
2014年
10期
1044-1048
,共5页
陈莉萍%王雅文%樊文梅%肖漓%石炳毅
陳莉萍%王雅文%樊文梅%肖巑%石炳毅
진리평%왕아문%번문매%초리%석병의
5-羟色胺%胆管上皮细胞%门管成纤维细胞%自分泌%旁分泌
5-羥色胺%膽管上皮細胞%門管成纖維細胞%自分泌%徬分泌
5-간색알%담관상피세포%문관성섬유세포%자분비%방분비
5-hydroxytryptamine%cholangiocyte%portal fibroblast%autocrine%paracrine
目的 探讨5-羟色胺(5-hydroxytryptamine,5-HT)在胆管上皮细胞(biliary epithelia cells,BECs)与门管区成纤维细胞(portal fibroblasts,PFs)之间自分泌/旁分泌效应中的意义,阐述两种细胞之间的相互作用.方法 体外细胞培养分为6组:1)BECs组单独培养;2)BECs+ TGF-β1组,BECs单独培养,用2 ng/ml重组TGF-β1干预24 h后更换培养液;3)BECs+5-HT组,BECs单独培养,以60 ng/ml的5-HT干预48 h后更换培养液;4)PFs组单独培养;5)PFs+ 5-HT组,PFs单独培养,以60 ng/ml的5-HT干预48 h后更换培养液;6)BECs+ PFs,共同培养.各组均在培养72 h后,以酶联免疫吸附分析法(ELISA)检测培养介质内5-HT、TGF-β1含量;实时荧光定量多聚酶链反应(QRT-PCR)检测BECs内色氨酸羟化酶(TPH1、TPH2)和5-HT受体1A、1B表达;以BrdU、α-SMA分别作为BECs增殖及PFs转化为肌纤维母细胞(myofibroblasts,MFs)的标志,免疫细胞化学检测.结果 单独培养的BECs表达5-HT合成限速酶TPH1、TPH2及5-HTR1A、5-HTR 1B,5-HT分泌较高而BECs增殖不明显;经TGF-β1处理或与PFs共培养后,TPH1、TPH2表达各减少80％和87％,5-HTR1A、5-HTR1B表达分别减少75％和85％,BECs增殖明显.单独培养的PFs分泌TGF-β1,部分呈α-SMA阳性的MFs;经5-HT处理或与BECs共培养后,TGF-β1表达及MFs显著增加.结论 BECs来源的5-HT以及PFs来源的TGF-β1介导BECs与PFs之间的自分泌与旁分泌效应,维持BECs增殖和PFs向MFs的转化,在胆管病发病机制中可能具有重要意义.
目的 探討5-羥色胺(5-hydroxytryptamine,5-HT)在膽管上皮細胞(biliary epithelia cells,BECs)與門管區成纖維細胞(portal fibroblasts,PFs)之間自分泌/徬分泌效應中的意義,闡述兩種細胞之間的相互作用.方法 體外細胞培養分為6組:1)BECs組單獨培養;2)BECs+ TGF-β1組,BECs單獨培養,用2 ng/ml重組TGF-β1榦預24 h後更換培養液;3)BECs+5-HT組,BECs單獨培養,以60 ng/ml的5-HT榦預48 h後更換培養液;4)PFs組單獨培養;5)PFs+ 5-HT組,PFs單獨培養,以60 ng/ml的5-HT榦預48 h後更換培養液;6)BECs+ PFs,共同培養.各組均在培養72 h後,以酶聯免疫吸附分析法(ELISA)檢測培養介質內5-HT、TGF-β1含量;實時熒光定量多聚酶鏈反應(QRT-PCR)檢測BECs內色氨痠羥化酶(TPH1、TPH2)和5-HT受體1A、1B錶達;以BrdU、α-SMA分彆作為BECs增殖及PFs轉化為肌纖維母細胞(myofibroblasts,MFs)的標誌,免疫細胞化學檢測.結果 單獨培養的BECs錶達5-HT閤成限速酶TPH1、TPH2及5-HTR1A、5-HTR 1B,5-HT分泌較高而BECs增殖不明顯;經TGF-β1處理或與PFs共培養後,TPH1、TPH2錶達各減少80％和87％,5-HTR1A、5-HTR1B錶達分彆減少75％和85％,BECs增殖明顯.單獨培養的PFs分泌TGF-β1,部分呈α-SMA暘性的MFs;經5-HT處理或與BECs共培養後,TGF-β1錶達及MFs顯著增加.結論 BECs來源的5-HT以及PFs來源的TGF-β1介導BECs與PFs之間的自分泌與徬分泌效應,維持BECs增殖和PFs嚮MFs的轉化,在膽管病髮病機製中可能具有重要意義.
목적 탐토5-간색알(5-hydroxytryptamine,5-HT)재담관상피세포(biliary epithelia cells,BECs)여문관구성섬유세포(portal fibroblasts,PFs)지간자분비/방분비효응중적의의,천술량충세포지간적상호작용.방법 체외세포배양분위6조:1)BECs조단독배양;2)BECs+ TGF-β1조,BECs단독배양,용2 ng/ml중조TGF-β1간예24 h후경환배양액;3)BECs+5-HT조,BECs단독배양,이60 ng/ml적5-HT간예48 h후경환배양액;4)PFs조단독배양;5)PFs+ 5-HT조,PFs단독배양,이60 ng/ml적5-HT간예48 h후경환배양액;6)BECs+ PFs,공동배양.각조균재배양72 h후,이매련면역흡부분석법(ELISA)검측배양개질내5-HT、TGF-β1함량;실시형광정량다취매련반응(QRT-PCR)검측BECs내색안산간화매(TPH1、TPH2)화5-HT수체1A、1B표체;이BrdU、α-SMA분별작위BECs증식급PFs전화위기섬유모세포(myofibroblasts,MFs)적표지,면역세포화학검측.결과 단독배양적BECs표체5-HT합성한속매TPH1、TPH2급5-HTR1A、5-HTR 1B,5-HT분비교고이BECs증식불명현;경TGF-β1처리혹여PFs공배양후,TPH1、TPH2표체각감소80％화87％,5-HTR1A、5-HTR1B표체분별감소75％화85％,BECs증식명현.단독배양적PFs분비TGF-β1,부분정α-SMA양성적MFs;경5-HT처리혹여BECs공배양후,TGF-β1표체급MFs현저증가.결론 BECs래원적5-HT이급PFs래원적TGF-β1개도BECs여PFs지간적자분비여방분비효응,유지BECs증식화PFs향MFs적전화,재담관병발병궤제중가능구유중요의의.
