江苏农业学报
江囌農業學報
강소농업학보
JIANGSU JOURNAL OF AGRICULTURAL SCIENCES
2014年
5期
1071-1076
,共6页
许梦微%张传健%周希%王志胜%侯继波%王继春
許夢微%張傳健%週希%王誌勝%侯繼波%王繼春
허몽미%장전건%주희%왕지성%후계파%왕계춘
鸭瘟病毒%LORF11同源子%聚合酶链式反应%鉴别诊断
鴨瘟病毒%LORF11同源子%聚閤酶鏈式反應%鑒彆診斷
압온병독%LORF11동원자%취합매련식반응%감별진단
duck enteritis virus%LORF11 homol-ogoue%polymerase chain reaction(PCR)%differential di-agnosis
为建立一种鉴别诊断鸭瘟病毒的 PCR 方法,根据已发表的8株鸭瘟病毒株的长区开放阅读框(LORF11)等位基因序列,在其开放阅读框等位基因的上游5 bp和下游101 bp的位置设计1对特异性引物。应用这对引物对鸭瘟病毒LH2011株、v2085株、VAC株、Clone-03株DNA进行PCR扩增,分别获得了4448 bp、3277 bp、934 bp和2518 bp的特异性条带。此PCR方法特异性强,敏感性高,可检测到10TCID50或0.1LD50的鸭瘟病毒。在感染鸭瘟病毒的组织(肝脏)中均能检测到鸭瘟病毒DNA。对疑似鸭瘟的临床病料的检测结果也证明,建立的PCR方法不仅能够鉴别样品是否感染了鸭瘟病毒,而且能鉴别感染的鸭瘟病毒的来源。
為建立一種鑒彆診斷鴨瘟病毒的 PCR 方法,根據已髮錶的8株鴨瘟病毒株的長區開放閱讀框(LORF11)等位基因序列,在其開放閱讀框等位基因的上遊5 bp和下遊101 bp的位置設計1對特異性引物。應用這對引物對鴨瘟病毒LH2011株、v2085株、VAC株、Clone-03株DNA進行PCR擴增,分彆穫得瞭4448 bp、3277 bp、934 bp和2518 bp的特異性條帶。此PCR方法特異性彊,敏感性高,可檢測到10TCID50或0.1LD50的鴨瘟病毒。在感染鴨瘟病毒的組織(肝髒)中均能檢測到鴨瘟病毒DNA。對疑似鴨瘟的臨床病料的檢測結果也證明,建立的PCR方法不僅能夠鑒彆樣品是否感染瞭鴨瘟病毒,而且能鑒彆感染的鴨瘟病毒的來源。
위건립일충감별진단압온병독적 PCR 방법,근거이발표적8주압온병독주적장구개방열독광(LORF11)등위기인서렬,재기개방열독광등위기인적상유5 bp화하유101 bp적위치설계1대특이성인물。응용저대인물대압온병독LH2011주、v2085주、VAC주、Clone-03주DNA진행PCR확증,분별획득료4448 bp、3277 bp、934 bp화2518 bp적특이성조대。차PCR방법특이성강,민감성고,가검측도10TCID50혹0.1LD50적압온병독。재감염압온병독적조직(간장)중균능검측도압온병독DNA。대의사압온적림상병료적검측결과야증명,건립적PCR방법불부능구감별양품시부감염료압온병독,이차능감별감염적압온병독적래원。
To develop a PCR method for differential diagnosis of duck enteritis virus ( DEV) , a pair of PCR primers was designed at 5 bp upstream and 101 bp downstream of its open reading frame based on published LORF11 homologous sequences of 8 duck enteritis virus strains. Using these primers, specific fragments of 4 448 bp, 3 277 bp, 934 bp and 2 518 bp were amplified using the DNAs of strain DEV LH2011, strain v2085, strain VAC and strain Clone-03 as tem-plate, respectively. The PCR method developed is specific to test DEV. Sensitivity test showed that 10TCID50 or 0. 1LD50 DEV can be detected. The PCR method could not only detect the infection of duck enteritis virus, but also the origin of the virus.