CAJ | 학술논문

应用RT-PCR 方法从PEDV流行毒株中扩增COE基因，并将其克隆至原核表达载体pET -32a，构建pET-32a-COE重组质粒。将重组质粒转化至宿主菌BL21（DE3）中，加入IPTG进行诱导表达。 SDS-PAGE分析结果显示，该重组蛋白获得了表达，主要以包涵体形式存在，分子量约为35．5 ku；Western-blot分析结果显示，所表达的重组蛋白能与抗PEDV小鼠血清反应。应用纯化的重组蛋白加入弗氏佐剂免疫6周龄BALB／C小鼠并采集血清， ELISA检测抗体效价达1∶3200以上，说明所表达的蛋白具有良好的免疫原性。
응용RT-PCR 방법종PEDV류행독주중확증COE기인，병장기극륭지원핵표체재체pET -32a，구건pET-32a-COE중조질립。장중조질립전화지숙주균BL21（DE3）중，가입IPTG진행유도표체。 SDS-PAGE분석결과현시，해중조단백획득료표체，주요이포함체형식존재，분자량약위35．5 ku；Western-blot분석결과현시，소표체적중조단백능여항PEDV소서혈청반응。응용순화적중조단백가입불씨좌제면역6주령BALB／C소서병채집혈청， ELISA검측항체효개체1∶3200이상，설명소표체적단백구유량호적면역원성。