广东医学
廣東醫學
엄동의학
GUNAGDONG MEDICAL JOURNAL
2014年
17期
2675-2677
,共3页
宫颈癌%Bcl-2%siRNA%阿霉素%细胞色素c
宮頸癌%Bcl-2%siRNA%阿黴素%細胞色素c
궁경암%Bcl-2%siRNA%아매소%세포색소c
目的：探讨siRNA抑制线粒体Bcl-2基因联合阿霉素对人宫颈癌SiHa细胞增殖和凋亡的影响及相关作用机制。方法将化学合成的靶向Bcl-2基因siRNA序列转染至SiHa细胞中，Western blot验证转染效率后，将SiHa细胞分为5组：空白对照组（不加任何处理）、阴性对照组（转染阴性siRNA序列）、干扰组（转染Bcl-2 siRNA序列）、阿霉素组（5μg／mL阿霉素处理）、联合组（转染siRNA序列＋5μg／mL阿霉素处理）。通过MTT比色法检测细胞增殖水平、流式细胞术检测细胞凋亡水平、分光光度法分别检测半胱氨酸蛋白酶Caspase-3和Caspase-9的活力变化以及细胞色素c（ Cyt-c）释放水平变化。结果 Bcl-2 siRNA转染后，相对于阿霉素组，联合组细胞增殖率明显降低，凋亡水平则明显上升（P＜0.01）；细胞周期各时相重新分布，G0／G1期细胞明显减少（P＜0.01），S期和G2／M期细胞则明显增多（P＜0.01）；Caspase-3和Caspase-9活力明显升高，Cyt-c释放水平亦显著增加（P＜0.01）。结论 Bcl-2靶向反义siRNA序列联合阿霉素处理能显著促进线粒体依赖性的细胞凋亡， Bcl-2可作为人宫颈癌基因治疗的候选靶点。
目的：探討siRNA抑製線粒體Bcl-2基因聯閤阿黴素對人宮頸癌SiHa細胞增殖和凋亡的影響及相關作用機製。方法將化學閤成的靶嚮Bcl-2基因siRNA序列轉染至SiHa細胞中，Western blot驗證轉染效率後，將SiHa細胞分為5組：空白對照組（不加任何處理）、陰性對照組（轉染陰性siRNA序列）、榦擾組（轉染Bcl-2 siRNA序列）、阿黴素組（5μg／mL阿黴素處理）、聯閤組（轉染siRNA序列＋5μg／mL阿黴素處理）。通過MTT比色法檢測細胞增殖水平、流式細胞術檢測細胞凋亡水平、分光光度法分彆檢測半胱氨痠蛋白酶Caspase-3和Caspase-9的活力變化以及細胞色素c（ Cyt-c）釋放水平變化。結果 Bcl-2 siRNA轉染後，相對于阿黴素組，聯閤組細胞增殖率明顯降低，凋亡水平則明顯上升（P＜0.01）；細胞週期各時相重新分佈，G0／G1期細胞明顯減少（P＜0.01），S期和G2／M期細胞則明顯增多（P＜0.01）；Caspase-3和Caspase-9活力明顯升高，Cyt-c釋放水平亦顯著增加（P＜0.01）。結論 Bcl-2靶嚮反義siRNA序列聯閤阿黴素處理能顯著促進線粒體依賴性的細胞凋亡， Bcl-2可作為人宮頸癌基因治療的候選靶點。
목적：탐토siRNA억제선립체Bcl-2기인연합아매소대인궁경암SiHa세포증식화조망적영향급상관작용궤제。방법장화학합성적파향Bcl-2기인siRNA서렬전염지SiHa세포중，Western blot험증전염효솔후，장SiHa세포분위5조：공백대조조（불가임하처리）、음성대조조（전염음성siRNA서렬）、간우조（전염Bcl-2 siRNA서렬）、아매소조（5μg／mL아매소처리）、연합조（전염siRNA서렬＋5μg／mL아매소처리）。통과MTT비색법검측세포증식수평、류식세포술검측세포조망수평、분광광도법분별검측반광안산단백매Caspase-3화Caspase-9적활력변화이급세포색소c（ Cyt-c）석방수평변화。결과 Bcl-2 siRNA전염후，상대우아매소조，연합조세포증식솔명현강저，조망수평칙명현상승（P＜0.01）；세포주기각시상중신분포，G0／G1기세포명현감소（P＜0.01），S기화G2／M기세포칙명현증다（P＜0.01）；Caspase-3화Caspase-9활력명현승고，Cyt-c석방수평역현저증가（P＜0.01）。결론 Bcl-2파향반의siRNA서렬연합아매소처리능현저촉진선립체의뢰성적세포조망， Bcl-2가작위인궁경암기인치료적후선파점。
