中国神经免疫学和神经病学杂志
中國神經免疫學和神經病學雜誌
중국신경면역학화신경병학잡지
CHINESE JOURNAL OF NEUROIMMUNOLOGY AND
2014年
3期
161-165
,共5页
罗文静%黄文%莫雪安%吴李硕
囉文靜%黃文%莫雪安%吳李碩
라문정%황문%막설안%오리석
过氧化物酶体增殖物激活受体%tat 基因产物 ,人类免疫缺陷病毒%细胞间黏附分子-1%血管细胞黏附分子-1%脑微血管内皮细胞
過氧化物酶體增殖物激活受體%tat 基因產物 ,人類免疫缺陷病毒%細胞間黏附分子-1%血管細胞黏附分子-1%腦微血管內皮細胞
과양화물매체증식물격활수체%tat 기인산물 ,인류면역결함병독%세포간점부분자-1%혈관세포점부분자-1%뇌미혈관내피세포
peroxisome proliferator-activated receptors%tat gene products,human immunodeficiency virus%intercellular adhesion molecule-1%vascular cell adhesion molecule-1%brain microvascular endothelial cells
目的：探讨过氧化物酶体增殖物激活受体γ（peroxisome proliferator‐activated receptor gamma ， PPARγ）对人类免疫缺陷病毒‐1型反式转录激活因子（HIV‐1 transactivator of transcription ，HIV‐1 Tat）诱导的脑微血管内皮细胞中黏附分子反应的影响及其作用机制。方法将培养的人脑微血管内皮细胞（human cere‐bral microvascular endothelial cells ，hCMEC／D3）给予 HIV‐1 Tat 、PPARγ激动剂罗格列酮、PPARγ拮抗剂GW9662、蛋白激酶 B（Akt）抑制剂 KP3721进行干预，并设立对照组。分别以蛋白免疫印迹法和实时反转录聚合酶链式反应检测 hCMEC／D3中细胞间黏附分子‐1（intercellular adhesion molecule‐1，ICAM‐1）、血管细胞黏附分子‐1（vascular cell adhesion molecule‐1，VCAM‐1）蛋白和 mRNA 表达。结果 HIV‐1 Tat 可诱导黏附分子ICAM‐1和 VCAM‐1的蛋白（P＜0.05，P＜0.01）及其 mRNA 表达增加（均 P＜0.01），PPARγ激动剂罗格列酮可抑制 HIV‐1 Tat 诱导的 ICAM‐1蛋白（P＜0.05）与 mRNA 以及 VCAM‐1的 mRNA 表达（均 P＜0.01），而这种抑制作用可被 PPARγ拮抗剂 GW9662和 Akt 抑制剂 KP3721逆转（均 P ＜0.01）。罗格列酮可抑制 HIV‐1 Tat 诱导的 Akt 磷酸化反应（P＜0.01）。结论 PPARγ可抑制 HIV‐1 Tat 诱导的脑微血管内皮细胞中黏附分子反应，Akt 信号转导通路在 PPARγ激动剂抑制血管内皮细胞炎性反应中起到重要的作用。
目的：探討過氧化物酶體增殖物激活受體γ（peroxisome proliferator‐activated receptor gamma ， PPARγ）對人類免疫缺陷病毒‐1型反式轉錄激活因子（HIV‐1 transactivator of transcription ，HIV‐1 Tat）誘導的腦微血管內皮細胞中黏附分子反應的影響及其作用機製。方法將培養的人腦微血管內皮細胞（human cere‐bral microvascular endothelial cells ，hCMEC／D3）給予 HIV‐1 Tat 、PPARγ激動劑囉格列酮、PPARγ拮抗劑GW9662、蛋白激酶 B（Akt）抑製劑 KP3721進行榦預，併設立對照組。分彆以蛋白免疫印跡法和實時反轉錄聚閤酶鏈式反應檢測 hCMEC／D3中細胞間黏附分子‐1（intercellular adhesion molecule‐1，ICAM‐1）、血管細胞黏附分子‐1（vascular cell adhesion molecule‐1，VCAM‐1）蛋白和 mRNA 錶達。結果 HIV‐1 Tat 可誘導黏附分子ICAM‐1和 VCAM‐1的蛋白（P＜0.05，P＜0.01）及其 mRNA 錶達增加（均 P＜0.01），PPARγ激動劑囉格列酮可抑製 HIV‐1 Tat 誘導的 ICAM‐1蛋白（P＜0.05）與 mRNA 以及 VCAM‐1的 mRNA 錶達（均 P＜0.01），而這種抑製作用可被 PPARγ拮抗劑 GW9662和 Akt 抑製劑 KP3721逆轉（均 P ＜0.01）。囉格列酮可抑製 HIV‐1 Tat 誘導的 Akt 燐痠化反應（P＜0.01）。結論 PPARγ可抑製 HIV‐1 Tat 誘導的腦微血管內皮細胞中黏附分子反應，Akt 信號轉導通路在 PPARγ激動劑抑製血管內皮細胞炎性反應中起到重要的作用。
목적：탐토과양화물매체증식물격활수체γ（peroxisome proliferator‐activated receptor gamma ， PPARγ）대인류면역결함병독‐1형반식전록격활인자（HIV‐1 transactivator of transcription ，HIV‐1 Tat）유도적뇌미혈관내피세포중점부분자반응적영향급기작용궤제。방법장배양적인뇌미혈관내피세포（human cere‐bral microvascular endothelial cells ，hCMEC／D3）급여 HIV‐1 Tat 、PPARγ격동제라격렬동、PPARγ길항제GW9662、단백격매 B（Akt）억제제 KP3721진행간예，병설립대조조。분별이단백면역인적법화실시반전록취합매련식반응검측 hCMEC／D3중세포간점부분자‐1（intercellular adhesion molecule‐1，ICAM‐1）、혈관세포점부분자‐1（vascular cell adhesion molecule‐1，VCAM‐1）단백화 mRNA 표체。결과 HIV‐1 Tat 가유도점부분자ICAM‐1화 VCAM‐1적단백（P＜0.05，P＜0.01）급기 mRNA 표체증가（균 P＜0.01），PPARγ격동제라격렬동가억제 HIV‐1 Tat 유도적 ICAM‐1단백（P＜0.05）여 mRNA 이급 VCAM‐1적 mRNA 표체（균 P＜0.01），이저충억제작용가피 PPARγ길항제 GW9662화 Akt 억제제 KP3721역전（균 P ＜0.01）。라격렬동가억제 HIV‐1 Tat 유도적 Akt 린산화반응（P＜0.01）。결론 PPARγ가억제 HIV‐1 Tat 유도적뇌미혈관내피세포중점부분자반응，Akt 신호전도통로재 PPARγ격동제억제혈관내피세포염성반응중기도중요적작용。
Objective To evaluate the protection effect of peroxisome proliferator‐activated receptor gamma (PPARγ) against HIV‐1 Tat‐induced responses of adhesion molecules in brain microvascular endothelial cells and the possible signaling mechanism .Methods The protein expressions or mRNA levels of intercellular adhesion molecule‐1 ( ICAM‐1 ) and vascular cell adhesion molecule‐1 ( VCAM‐1 ) in human cerebral microvascular endothelial cells (hCMEC/D3 ) were assessed by Western blot or Real‐time‐PCR , with the exposure of HIV‐1 Tat , rosiglitazone (PPARγ agonist) , GW9662 (PPARγ antagonist) and/or KP3721 (Akt inhibitor) .Results HIV‐1 Tat induced upregulation of the protein expression of ICAM‐1 (P< 0.05) ,VCAM‐1 (P< 0.01) in hCMEC/D3 as well as mRNA levels ( P < 0.01 , respectively ) . Exposure to PPARγ agonist rosiglitazone decreased Tat‐induced protein expression of ICAM‐1 (P < 0.05) ,ICAM‐1 mRNA and VCAM‐1 mRNA levels (P < 0.01 , respectively ) . This inhibition was abolished by the addition of PPARγ antagonist GW9662 (P< 0.01 ,respectively) and Akt inhibitor KP3721 (P< 0.01 ,respectively) .Treatment of hCMEC/D3 with rosiglitazone dramatically inhibited the HIV‐1 Tat‐induced inflammatory activation of Akt phosphorylation (P < 0.01 ) .Conclusions PPARγ may inhibit HIV‐1 Tat‐induced responses of adhesion molecules in brain microvascular endothelial cells. Akt signaling pathway plays a key role on the protection effect of PPARγ agonist on vascular inflammatory response that contributes to the destruction of blood brain barrier .
