中国老年学杂志
中國老年學雜誌
중국노년학잡지
CHINESE JOURNAL OF GERONTOLOGY
2014年
20期
5799-5801
,共3页
黄波%王晓东%郎贤平
黃波%王曉東%郎賢平
황파%왕효동%랑현평
SATB1%小细胞肺癌%siRNA%细胞凋亡
SATB1%小細胞肺癌%siRNA%細胞凋亡
SATB1%소세포폐암%siRNA%세포조망
目的:构建SATB1的siRNA表达载体,并研究其对小细胞肺癌( SCLC)的作用。方法根据SATB1的DNA序列设计3对siRNA引物,构建携带绿色荧光的重组质粒 SATB1-siRNA-1、SATB1-siRNA-2、SATB1-siRNA-N。应用 lipofect2000将载体 SATB1-siRNA-1、SATB1-siRNA-2、SATB1-siRNA-N转染入SCLC细胞NCI-H446中。转染48 h后应用Western印迹法检测转染后 SATB1蛋白表达细胞增殖能力检测( MTT法)、Tran-swell小室、流式细胞仪检测NCI-H446细胞在转染前后的增殖能力、侵袭能力、凋亡的改变。结果成功的构建了 SATB1基因的 siRNA 表达载体。转染SATB1-siRNA后的SCLC细胞内可见绿色荧光。转染SATB1-siRNA-1、SATB1-siRNA-2的NCI-H446细胞中其SATB1表达明显低于转染SATB1-siRNA-N及空白对照组的NCI-H446细胞中。 MTT实验提示,转染SATB1-siRNA-1、SATB1-siRNA-2的SCLC细胞与转染 SATB1-siRNA-N的同类细胞相比增殖能力受到明显抑制。 Transwell结果显示转染SATB1-siRNA-1、SATB1-siRNA-2后的SCLC细胞穿膜细胞数较未转染的和转染SATB1-siRNA-N组细胞明显减少。流式结果显示细胞凋亡率转染SATB1-siRNA-1和SATB1-siRNA-2的细胞均显著高于转染 SATB1-siRNA -N和空白对照组细胞(P<0.05)。结论 SATB1-siRNA可抑制SCLC细胞的增殖及侵袭能力,并诱导其细胞凋亡,提示SATB1在人SCLC的转移中起着重要的作用。
目的:構建SATB1的siRNA錶達載體,併研究其對小細胞肺癌( SCLC)的作用。方法根據SATB1的DNA序列設計3對siRNA引物,構建攜帶綠色熒光的重組質粒 SATB1-siRNA-1、SATB1-siRNA-2、SATB1-siRNA-N。應用 lipofect2000將載體 SATB1-siRNA-1、SATB1-siRNA-2、SATB1-siRNA-N轉染入SCLC細胞NCI-H446中。轉染48 h後應用Western印跡法檢測轉染後 SATB1蛋白錶達細胞增殖能力檢測( MTT法)、Tran-swell小室、流式細胞儀檢測NCI-H446細胞在轉染前後的增殖能力、侵襲能力、凋亡的改變。結果成功的構建瞭 SATB1基因的 siRNA 錶達載體。轉染SATB1-siRNA後的SCLC細胞內可見綠色熒光。轉染SATB1-siRNA-1、SATB1-siRNA-2的NCI-H446細胞中其SATB1錶達明顯低于轉染SATB1-siRNA-N及空白對照組的NCI-H446細胞中。 MTT實驗提示,轉染SATB1-siRNA-1、SATB1-siRNA-2的SCLC細胞與轉染 SATB1-siRNA-N的同類細胞相比增殖能力受到明顯抑製。 Transwell結果顯示轉染SATB1-siRNA-1、SATB1-siRNA-2後的SCLC細胞穿膜細胞數較未轉染的和轉染SATB1-siRNA-N組細胞明顯減少。流式結果顯示細胞凋亡率轉染SATB1-siRNA-1和SATB1-siRNA-2的細胞均顯著高于轉染 SATB1-siRNA -N和空白對照組細胞(P<0.05)。結論 SATB1-siRNA可抑製SCLC細胞的增殖及侵襲能力,併誘導其細胞凋亡,提示SATB1在人SCLC的轉移中起著重要的作用。
목적:구건SATB1적siRNA표체재체,병연구기대소세포폐암( SCLC)적작용。방법근거SATB1적DNA서렬설계3대siRNA인물,구건휴대록색형광적중조질립 SATB1-siRNA-1、SATB1-siRNA-2、SATB1-siRNA-N。응용 lipofect2000장재체 SATB1-siRNA-1、SATB1-siRNA-2、SATB1-siRNA-N전염입SCLC세포NCI-H446중。전염48 h후응용Western인적법검측전염후 SATB1단백표체세포증식능력검측( MTT법)、Tran-swell소실、류식세포의검측NCI-H446세포재전염전후적증식능력、침습능력、조망적개변。결과성공적구건료 SATB1기인적 siRNA 표체재체。전염SATB1-siRNA후적SCLC세포내가견록색형광。전염SATB1-siRNA-1、SATB1-siRNA-2적NCI-H446세포중기SATB1표체명현저우전염SATB1-siRNA-N급공백대조조적NCI-H446세포중。 MTT실험제시,전염SATB1-siRNA-1、SATB1-siRNA-2적SCLC세포여전염 SATB1-siRNA-N적동류세포상비증식능력수도명현억제。 Transwell결과현시전염SATB1-siRNA-1、SATB1-siRNA-2후적SCLC세포천막세포수교미전염적화전염SATB1-siRNA-N조세포명현감소。류식결과현시세포조망솔전염SATB1-siRNA-1화SATB1-siRNA-2적세포균현저고우전염 SATB1-siRNA -N화공백대조조세포(P<0.05)。결론 SATB1-siRNA가억제SCLC세포적증식급침습능력,병유도기세포조망,제시SATB1재인SCLC적전이중기착중요적작용。