中国老年学杂志
中國老年學雜誌
중국노년학잡지
CHINESE JOURNAL OF GERONTOLOGY
2014年
20期
5770-5772
,共3页
郑斌%刘涛%郑永晨%李佳睿
鄭斌%劉濤%鄭永晨%李佳睿
정빈%류도%정영신%리가예
Toll样受体9%基因重组%真核细胞%CpG
Toll樣受體9%基因重組%真覈細胞%CpG
Toll양수체9%기인중조%진핵세포%CpG
目的:克隆人Toll样受体9(TLR9)基因,重组入真核表达载体,转染真核细胞,检测对CpG的反应。方法利用逆转录PCR从人外周血mRNA扩增TLR9基因;TLR9基因定向重组入真核表达载体pcDNA3.0;利用磷酸钙转染方法导入肝癌细胞系SMMC7721,经G418培养筛选,克隆出携有人TLR9 CDNA的细胞系;用不同的CpG刺激转染的细胞系观察生长率。结果逆转录PCR扩增出3.0 kb的DNA片段,经TA克隆和细胞DNA序列分析为人TLR9基因全序列;利用定向克隆的方法将人TLR9基因成功重组入pcDNA3.0。结论制备的SMMC7wgq-TLR9系可以用于CpG研究。
目的:剋隆人Toll樣受體9(TLR9)基因,重組入真覈錶達載體,轉染真覈細胞,檢測對CpG的反應。方法利用逆轉錄PCR從人外週血mRNA擴增TLR9基因;TLR9基因定嚮重組入真覈錶達載體pcDNA3.0;利用燐痠鈣轉染方法導入肝癌細胞繫SMMC7721,經G418培養篩選,剋隆齣攜有人TLR9 CDNA的細胞繫;用不同的CpG刺激轉染的細胞繫觀察生長率。結果逆轉錄PCR擴增齣3.0 kb的DNA片段,經TA剋隆和細胞DNA序列分析為人TLR9基因全序列;利用定嚮剋隆的方法將人TLR9基因成功重組入pcDNA3.0。結論製備的SMMC7wgq-TLR9繫可以用于CpG研究。
목적:극륭인Toll양수체9(TLR9)기인,중조입진핵표체재체,전염진핵세포,검측대CpG적반응。방법이용역전록PCR종인외주혈mRNA확증TLR9기인;TLR9기인정향중조입진핵표체재체pcDNA3.0;이용린산개전염방법도입간암세포계SMMC7721,경G418배양사선,극륭출휴유인TLR9 CDNA적세포계;용불동적CpG자격전염적세포계관찰생장솔。결과역전록PCR확증출3.0 kb적DNA편단,경TA극륭화세포DNA서렬분석위인TLR9기인전서렬;이용정향극륭적방법장인TLR9기인성공중조입pcDNA3.0。결론제비적SMMC7wgq-TLR9계가이용우CpG연구。