热带作物学报
熱帶作物學報
열대작물학보
CHINESE JOURNAL OF TROPICAL CROPS
2014年
9期
1809-1815
,共7页
刘晓妹%郑服丛%张欣%漆艳香%谢艺贤%张贺%蒲金基
劉曉妹%鄭服叢%張訢%漆豔香%謝藝賢%張賀%蒲金基
류효매%정복총%장흔%칠염향%사예현%장하%포금기
多主棒孢菌%毒素基因%克隆%致病力
多主棒孢菌%毒素基因%剋隆%緻病力
다주봉포균%독소기인%극륭%치병력
Corynespora cassiicolas%Toxin gene%Cloning%Pathogenicity
为了探明多主棒孢菌(Corynespora cassiicola)毒素基因cc004-cas序列特征及其功能,以巴西橡胶树棒孢霉落叶病菌为材料,采用SEFA-PCR和RT-PCR技术对毒素基因cc0004-cas进行扩增,并通过插入潮霉素B基因获得其突变体.序列特征分析结果表明,cc004-cas基因DNA和cDNA全长分别为2 800 bp和180 bp,编码区含2个内含子(67 bp和49 bp),推测编码59个氨基酸,其分子量约为5.92 ku,等电点pⅠ为5.70,与NCBI中报道的C.cassiicola毒素基因cas编码的毒素前体pro-cassiicolin的氨基酸序列(0HABV25895.1)相似性达85％.cc004-cas突变体表型测定结果表明:在菌落和菌丝形态、生长,产孢量、孢子萌发,菌丝生长对温度、pH要求,产生漆酶和纤维素酶的能力方面与野生型无显著差异;但用菌饼接种橡胶树嫩叶,致病力略有下降,用粗毒素接种时,致病力明显减轻,可见毒素是多主棒孢菌的一个重要的毒力因子,但不是唯一的因子.
為瞭探明多主棒孢菌(Corynespora cassiicola)毒素基因cc004-cas序列特徵及其功能,以巴西橡膠樹棒孢黴落葉病菌為材料,採用SEFA-PCR和RT-PCR技術對毒素基因cc0004-cas進行擴增,併通過插入潮黴素B基因穫得其突變體.序列特徵分析結果錶明,cc004-cas基因DNA和cDNA全長分彆為2 800 bp和180 bp,編碼區含2箇內含子(67 bp和49 bp),推測編碼59箇氨基痠,其分子量約為5.92 ku,等電點pⅠ為5.70,與NCBI中報道的C.cassiicola毒素基因cas編碼的毒素前體pro-cassiicolin的氨基痠序列(0HABV25895.1)相似性達85％.cc004-cas突變體錶型測定結果錶明:在菌落和菌絲形態、生長,產孢量、孢子萌髮,菌絲生長對溫度、pH要求,產生漆酶和纖維素酶的能力方麵與野生型無顯著差異;但用菌餅接種橡膠樹嫩葉,緻病力略有下降,用粗毒素接種時,緻病力明顯減輕,可見毒素是多主棒孢菌的一箇重要的毒力因子,但不是唯一的因子.
위료탐명다주봉포균(Corynespora cassiicola)독소기인cc004-cas서렬특정급기공능,이파서상효수봉포매락협병균위재료,채용SEFA-PCR화RT-PCR기술대독소기인cc0004-cas진행확증,병통과삽입조매소B기인획득기돌변체.서렬특정분석결과표명,cc004-cas기인DNA화cDNA전장분별위2 800 bp화180 bp,편마구함2개내함자(67 bp화49 bp),추측편마59개안기산,기분자량약위5.92 ku,등전점pⅠ위5.70,여NCBI중보도적C.cassiicola독소기인cas편마적독소전체pro-cassiicolin적안기산서렬(0HABV25895.1)상사성체85％.cc004-cas돌변체표형측정결과표명:재균락화균사형태、생장,산포량、포자맹발,균사생장대온도、pH요구,산생칠매화섬유소매적능력방면여야생형무현저차이;단용균병접충상효수눈협,치병력략유하강,용조독소접충시,치병력명현감경,가견독소시다주봉포균적일개중요적독력인자,단불시유일적인자.
