中国畜牧杂志
中國畜牧雜誌
중국축목잡지
CHINESE JOURNAL OF ANIMAL SCIENCE
2014年
19期
10-16
,共7页
林宝山%兰道亮%陈亚冰%黄偲%梁彦彦%李键
林寶山%蘭道亮%陳亞冰%黃偲%樑彥彥%李鍵
림보산%란도량%진아빙%황시%량언언%리건
TLR7%克隆%荧光定量PCR%组织表达分布%牦牛
TLR7%剋隆%熒光定量PCR%組織錶達分佈%牦牛
TLR7%극륭%형광정량PCR%조직표체분포%모우
TLR7%Cloning%real time PCR%expression and distribution in tissues%yak
为了解牦牛TLR7基因特点及其在牦牛各组织器官动态表达分布规律.根据GenBank中牛TLR7 序列设计引物克隆并对所得序列进行生物信息学分析,并以β-actin为参照基因,SYBR Green Ⅰ为荧光染料,建立检测牦牛天然免疫受体TLRs家族TLR7基因的荧光定量PCR方法,对TLR7基因在牦牛各组织中的表达分布进行研究.结果表明:克隆得到牦牛TLR7基因编码区全长3 153 bp,编码氨基酸1 050个,N端含有27个氨基酸组成的信号肽,分子量120.7192 ku,理论等电点为7.35;TLR7编码蛋白整体表现为亲水性;10条序列当中牦牛与野牦牛、普通牛、绵羊等物种具有较高的同源性,在系统发育树中距离最近,说明TLR7基因序列具有较高的保守性;荧光定量分析发现,TLR7基因在牦牛所有组织中均有表达,TLR7基因在肾脏表达量最高,在大肠表达量最低,在肝、脾、肺、卵巢、小肠、心、胃、肌肉、乳腺等组织依次有较高的表达.该研究结果为理解TLRs在牦牛等其他高原动物体内的分布及动态表达规律以及牦牛抗病毒免疫及育种的相关研究奠定了基础.
為瞭解牦牛TLR7基因特點及其在牦牛各組織器官動態錶達分佈規律.根據GenBank中牛TLR7 序列設計引物剋隆併對所得序列進行生物信息學分析,併以β-actin為參照基因,SYBR Green Ⅰ為熒光染料,建立檢測牦牛天然免疫受體TLRs傢族TLR7基因的熒光定量PCR方法,對TLR7基因在牦牛各組織中的錶達分佈進行研究.結果錶明:剋隆得到牦牛TLR7基因編碼區全長3 153 bp,編碼氨基痠1 050箇,N耑含有27箇氨基痠組成的信號肽,分子量120.7192 ku,理論等電點為7.35;TLR7編碼蛋白整體錶現為親水性;10條序列噹中牦牛與野牦牛、普通牛、綿羊等物種具有較高的同源性,在繫統髮育樹中距離最近,說明TLR7基因序列具有較高的保守性;熒光定量分析髮現,TLR7基因在牦牛所有組織中均有錶達,TLR7基因在腎髒錶達量最高,在大腸錶達量最低,在肝、脾、肺、卵巢、小腸、心、胃、肌肉、乳腺等組織依次有較高的錶達.該研究結果為理解TLRs在牦牛等其他高原動物體內的分佈及動態錶達規律以及牦牛抗病毒免疫及育種的相關研究奠定瞭基礎.
위료해모우TLR7기인특점급기재모우각조직기관동태표체분포규률.근거GenBank중우TLR7 서렬설계인물극륭병대소득서렬진행생물신식학분석,병이β-actin위삼조기인,SYBR Green Ⅰ위형광염료,건립검측모우천연면역수체TLRs가족TLR7기인적형광정량PCR방법,대TLR7기인재모우각조직중적표체분포진행연구.결과표명:극륭득도모우TLR7기인편마구전장3 153 bp,편마안기산1 050개,N단함유27개안기산조성적신호태,분자량120.7192 ku,이론등전점위7.35;TLR7편마단백정체표현위친수성;10조서렬당중모우여야모우、보통우、면양등물충구유교고적동원성,재계통발육수중거리최근,설명TLR7기인서렬구유교고적보수성;형광정량분석발현,TLR7기인재모우소유조직중균유표체,TLR7기인재신장표체량최고,재대장표체량최저,재간、비、폐、란소、소장、심、위、기육、유선등조직의차유교고적표체.해연구결과위리해TLRs재모우등기타고원동물체내적분포급동태표체규률이급모우항병독면역급육충적상관연구전정료기출.
