中山大学学报（医学科学版）
中山大學學報（醫學科學版）
중산대학학보（의학과학판）
JOURNAL OF SUN YAT-SEN UNIVERSITY(MEDICAL SCIENCES)
2014年
5期
780-785
,共6页
胡波%张新玲%周文营%李林
鬍波%張新玲%週文營%李林
호파%장신령%주문영%리림
鼻咽癌%gp125%毕赤酵母
鼻嚥癌%gp125%畢赤酵母
비인암%gp125%필적효모
nasopharyngeal carcinoma%gp125%Pichia pastoris
[目的]采用毕赤酵母系统构建表达EB病毒gp125重组蛋白,并探讨其在鼻咽癌血清学诊断中的应用.[方法]以EBV DNA为模版,采用PCR法扩增gp125的编码基因BALF4 (2574 bp),与毕赤酵母表达载体pPIC9连接,转化酵母菌GS115,甲醇诱导重组蛋白表达.重组蛋白经SDS-PAGE、免疫印迹法鉴定后,包被聚丙乙烯板,制备ELISA试剂检测鼻咽癌患者和正常人群gp 125-IgA抗体.[结果]在毕赤酵母菌中高效地表达了分泌型的gp125重组蛋白,相对分子质量为110 000,免疫印迹证实目的蛋白有免疫原性,gp125蛋白经纯化后作为包被抗原检测鼻咽癌患者和健康对照的敏感度和特异度分别为78.0％和92.0％.[结论]采用毕赤酵母系统高效分泌表达了gp125重组蛋白,初步评估了gp125蛋白在鼻咽癌血清筛选中的诊断价值.
[目的]採用畢赤酵母繫統構建錶達EB病毒gp125重組蛋白,併探討其在鼻嚥癌血清學診斷中的應用.[方法]以EBV DNA為模版,採用PCR法擴增gp125的編碼基因BALF4 (2574 bp),與畢赤酵母錶達載體pPIC9連接,轉化酵母菌GS115,甲醇誘導重組蛋白錶達.重組蛋白經SDS-PAGE、免疫印跡法鑒定後,包被聚丙乙烯闆,製備ELISA試劑檢測鼻嚥癌患者和正常人群gp 125-IgA抗體.[結果]在畢赤酵母菌中高效地錶達瞭分泌型的gp125重組蛋白,相對分子質量為110 000,免疫印跡證實目的蛋白有免疫原性,gp125蛋白經純化後作為包被抗原檢測鼻嚥癌患者和健康對照的敏感度和特異度分彆為78.0％和92.0％.[結論]採用畢赤酵母繫統高效分泌錶達瞭gp125重組蛋白,初步評估瞭gp125蛋白在鼻嚥癌血清篩選中的診斷價值.
[목적]채용필적효모계통구건표체EB병독gp125중조단백,병탐토기재비인암혈청학진단중적응용.[방법]이EBV DNA위모판,채용PCR법확증gp125적편마기인BALF4 (2574 bp),여필적효모표체재체pPIC9련접,전화효모균GS115,갑순유도중조단백표체.중조단백경SDS-PAGE、면역인적법감정후,포피취병을희판,제비ELISA시제검측비인암환자화정상인군gp 125-IgA항체.[결과]재필적효모균중고효지표체료분비형적gp125중조단백,상대분자질량위110 000,면역인적증실목적단백유면역원성,gp125단백경순화후작위포피항원검측비인암환자화건강대조적민감도화특이도분별위78.0％화92.0％.[결론]채용필적효모계통고효분비표체료gp125중조단백,초보평고료gp125단백재비인암혈청사선중적진단개치.
