中国医科大学学报
中國醫科大學學報
중국의과대학학보
JOURNAL OF CHINA MEDICAL UNIVERSITY
2014年
9期
821-825
,共5页
张秀伟%郝凤霞%贺佳妮%谢玲玲%付琳%董千泽%李庆昌
張秀偉%郝鳳霞%賀佳妮%謝玲玲%付琳%董韆澤%李慶昌
장수위%학봉하%하가니%사령령%부림%동천택%리경창
染色质重塑因子1%肺癌%小干扰RNA%磷酸化细胞外调节蛋白激酶%cyclinD1
染色質重塑因子1%肺癌%小榦擾RNA%燐痠化細胞外調節蛋白激酶%cyclinD1
염색질중소인자1%폐암%소간우RNA%린산화세포외조절단백격매%cyclinD1
remodeling and spacing factor 1%lung cancer%small interfering RNA%phosphorylation of extracellular-regulated protein kinase%cyclinD1
目的 检测染色质重塑因子1(Rsf-1)对肺癌增殖能力的影响,初步探讨Rsf-1促进肺癌增殖的分子机制.方法 应用Western blot方法筛选Rsf-1高表达人肺癌H1299、H460细胞系,通过小干扰RNA (siRNA)方法干扰内源性Rsf-1表达,并检测干扰效率.应用集落形成、流式细胞术检测Rsf-1干扰前后肺癌细胞增殖能力的变化.应用Western blot检测干扰内源性Rsf-1表达前后肺癌细胞中增殖相关因子的变化.结果 Western blot结果显示:肺癌细胞中Rsf-1蛋白表达水平明显高于正常支气管上皮HBE细胞系,其中H1299、H460细胞中存在非常明显的Rsf-1高表达.转染Rsf-1特异的siRNA于高表达Rsf-1的H1299和H460细胞后,其克隆形成明显少于对照组(H1299细胞中对照组和干扰组分别为123±15和83±9; H460细胞中对照组和干扰组分别为218±18和112±17)(P＜0.05).流式细胞术结果显示:干扰内源性Rsf-1表达后,H1299和H460细胞中Gt期细胞比例增多(H1299细胞中对照组和干扰组分别为56％±5％和71％±7％;H460细胞中对照组和干扰组分别为53％±4％和70％±6％),S期细胞比例减少(H1299细胞中对照组和干扰组分别为17％±2％和11％±5％;H460细胞中对照组和干扰组分别为19％±2％和10％±5％).细胞周期相关蛋白检测结果:干扰内源性Rsf-1表达后,H1299和H460细胞中cyclinD1和磷酸化细胞外调节蛋白激酶(pERK)水平明显下调.干扰Rsf-1在下调H1299和H460细胞pERK蛋白表达的作用结果与应用细胞外调节蛋白激酶(ERK)抑制剂U0126相似.结论 Rsf-1可通过cyclinD1/ERK相关通路促进肺癌细胞的增殖.
目的 檢測染色質重塑因子1(Rsf-1)對肺癌增殖能力的影響,初步探討Rsf-1促進肺癌增殖的分子機製.方法 應用Western blot方法篩選Rsf-1高錶達人肺癌H1299、H460細胞繫,通過小榦擾RNA (siRNA)方法榦擾內源性Rsf-1錶達,併檢測榦擾效率.應用集落形成、流式細胞術檢測Rsf-1榦擾前後肺癌細胞增殖能力的變化.應用Western blot檢測榦擾內源性Rsf-1錶達前後肺癌細胞中增殖相關因子的變化.結果 Western blot結果顯示:肺癌細胞中Rsf-1蛋白錶達水平明顯高于正常支氣管上皮HBE細胞繫,其中H1299、H460細胞中存在非常明顯的Rsf-1高錶達.轉染Rsf-1特異的siRNA于高錶達Rsf-1的H1299和H460細胞後,其剋隆形成明顯少于對照組(H1299細胞中對照組和榦擾組分彆為123±15和83±9; H460細胞中對照組和榦擾組分彆為218±18和112±17)(P＜0.05).流式細胞術結果顯示:榦擾內源性Rsf-1錶達後,H1299和H460細胞中Gt期細胞比例增多(H1299細胞中對照組和榦擾組分彆為56％±5％和71％±7％;H460細胞中對照組和榦擾組分彆為53％±4％和70％±6％),S期細胞比例減少(H1299細胞中對照組和榦擾組分彆為17％±2％和11％±5％;H460細胞中對照組和榦擾組分彆為19％±2％和10％±5％).細胞週期相關蛋白檢測結果:榦擾內源性Rsf-1錶達後,H1299和H460細胞中cyclinD1和燐痠化細胞外調節蛋白激酶(pERK)水平明顯下調.榦擾Rsf-1在下調H1299和H460細胞pERK蛋白錶達的作用結果與應用細胞外調節蛋白激酶(ERK)抑製劑U0126相似.結論 Rsf-1可通過cyclinD1/ERK相關通路促進肺癌細胞的增殖.
목적 검측염색질중소인자1(Rsf-1)대폐암증식능력적영향,초보탐토Rsf-1촉진폐암증식적분자궤제.방법 응용Western blot방법사선Rsf-1고표체인폐암H1299、H460세포계,통과소간우RNA (siRNA)방법간우내원성Rsf-1표체,병검측간우효솔.응용집락형성、류식세포술검측Rsf-1간우전후폐암세포증식능력적변화.응용Western blot검측간우내원성Rsf-1표체전후폐암세포중증식상관인자적변화.결과 Western blot결과현시:폐암세포중Rsf-1단백표체수평명현고우정상지기관상피HBE세포계,기중H1299、H460세포중존재비상명현적Rsf-1고표체.전염Rsf-1특이적siRNA우고표체Rsf-1적H1299화H460세포후,기극륭형성명현소우대조조(H1299세포중대조조화간우조분별위123±15화83±9; H460세포중대조조화간우조분별위218±18화112±17)(P＜0.05).류식세포술결과현시:간우내원성Rsf-1표체후,H1299화H460세포중Gt기세포비례증다(H1299세포중대조조화간우조분별위56％±5％화71％±7％;H460세포중대조조화간우조분별위53％±4％화70％±6％),S기세포비례감소(H1299세포중대조조화간우조분별위17％±2％화11％±5％;H460세포중대조조화간우조분별위19％±2％화10％±5％).세포주기상관단백검측결과:간우내원성Rsf-1표체후,H1299화H460세포중cyclinD1화린산화세포외조절단백격매(pERK)수평명현하조.간우Rsf-1재하조H1299화H460세포pERK단백표체적작용결과여응용세포외조절단백격매(ERK)억제제U0126상사.결론 Rsf-1가통과cyclinD1/ERK상관통로촉진폐암세포적증식.
