中国医科大学学报
中國醫科大學學報
중국의과대학학보
JOURNAL OF CHINA MEDICAL UNIVERSITY
2014年
9期
777-780
,共4页
孙宇%封瑞%孙威%胡慧媛%郝丽英
孫宇%封瑞%孫威%鬍慧媛%郝麗英
손우%봉서%손위%호혜원%학려영
包涵体%变性再复性%钙离子通道
包涵體%變性再複性%鈣離子通道
포함체%변성재복성%개리자통도
inclusion body%denaturation and renaturation%calcium channel
目的 探寻诱导谷胱甘肽转移酶(GST)与Cavl.2钙通道片段CT1重组的易形成包涵体的大分子融合蛋白的提取与纯化的方法.方法 在E.coli BL21中转化入pGEX-6p-3/CT1重组质粒并诱导表达,采用GST包涵体变性复性试剂盒和非离子去污剂B-PER分离纯化GST-CT1融合蛋白,用Pull down assay方法鉴定GST-CT1融合蛋白及其生物活性.结果 应用GST包涵体变性复性试剂盒和非离子去污剂B-PER能够分离得到高纯度的易形成包涵体的GST-CT1融合蛋白,且分离纯化的GST-CT1融合蛋白具有与钙调蛋白结合的生物活性.结论 操作简易的GST包涵体变性复性法能够针对易形成包涵体的GST-CT1融合蛋白进行分离和纯化,且得到的蛋白具有生物学活性.
目的 探尋誘導穀胱甘肽轉移酶(GST)與Cavl.2鈣通道片段CT1重組的易形成包涵體的大分子融閤蛋白的提取與純化的方法.方法 在E.coli BL21中轉化入pGEX-6p-3/CT1重組質粒併誘導錶達,採用GST包涵體變性複性試劑盒和非離子去汙劑B-PER分離純化GST-CT1融閤蛋白,用Pull down assay方法鑒定GST-CT1融閤蛋白及其生物活性.結果 應用GST包涵體變性複性試劑盒和非離子去汙劑B-PER能夠分離得到高純度的易形成包涵體的GST-CT1融閤蛋白,且分離純化的GST-CT1融閤蛋白具有與鈣調蛋白結閤的生物活性.結論 操作簡易的GST包涵體變性複性法能夠針對易形成包涵體的GST-CT1融閤蛋白進行分離和純化,且得到的蛋白具有生物學活性.
목적 탐심유도곡광감태전이매(GST)여Cavl.2개통도편단CT1중조적역형성포함체적대분자융합단백적제취여순화적방법.방법 재E.coli BL21중전화입pGEX-6p-3/CT1중조질립병유도표체,채용GST포함체변성복성시제합화비리자거오제B-PER분리순화GST-CT1융합단백,용Pull down assay방법감정GST-CT1융합단백급기생물활성.결과 응용GST포함체변성복성시제합화비리자거오제B-PER능구분리득도고순도적역형성포함체적GST-CT1융합단백,차분리순화적GST-CT1융합단백구유여개조단백결합적생물활성.결론 조작간역적GST포함체변성복성법능구침대역형성포함체적GST-CT1융합단백진행분리화순화,차득도적단백구유생물학활성.