中国脊柱脊髓杂志
中國脊柱脊髓雜誌
중국척주척수잡지
CHINESE JOURNAL OF SPINE AND SPINAL CORD
2014年
9期
834-838
,共5页
高瑞%袁文%王新伟%杨立利%陈华江
高瑞%袁文%王新偉%楊立利%陳華江
고서%원문%왕신위%양립리%진화강
骨髓间充质干细胞%嗅鞘细胞%共培养%分化
骨髓間充質榦細胞%嗅鞘細胞%共培養%分化
골수간충질간세포%후초세포%공배양%분화
Bone mesenchymal stem cell%Olfactory ensheathing cell%Co-culture%Differentiation
目的:观察体外骨髓间充质干细胞(BMSC)和嗅鞘细胞(OEC)非接触共培养时,OEC对BMSC向神经样细胞诱导分化的影响.方法:采用5～6周龄、体重100g左右的SPF级雄性Sprague Dawley (SD)品系大鼠20只,分离培养大鼠BMSC和OEC,BMSC取自双侧股骨,OEC取自嗅上皮.使用6孔0.4μm的Transwell共培养系统进行培养.将2×104/cm2的第3代OEC置于共培养系统上层,3×104/cm2的第3代BMSC置于下层.对共培养7d和14d后的BMSC行免疫组化染色,检测神经细胞特异性蛋白巢蛋白(Nestin)、神经元类型Ⅲβ-微管蛋白(Tuj-1)和神经胶质纤维酸性蛋白(GFAP)的表达情况.流式细胞仪检测Nestin、Tuj-1和GFAP阳性细胞的分布和所占的比例.结果:免疫组化检测显示,共培养7d和14d后BMSC均表达Nestin、Tuj-1和GFAP.流式细胞仪分析,共培养7d后Nestin、Tuj-1和GFAP阳性细胞比例分别为46.3％、76.5％和23.2％,共培养14d后分别为27.7％、89.1％和50％.结论:非接触共培养条件下,OEC能诱导BMSC向神经样细胞分化.
目的:觀察體外骨髓間充質榦細胞(BMSC)和嗅鞘細胞(OEC)非接觸共培養時,OEC對BMSC嚮神經樣細胞誘導分化的影響.方法:採用5～6週齡、體重100g左右的SPF級雄性Sprague Dawley (SD)品繫大鼠20隻,分離培養大鼠BMSC和OEC,BMSC取自雙側股骨,OEC取自嗅上皮.使用6孔0.4μm的Transwell共培養繫統進行培養.將2×104/cm2的第3代OEC置于共培養繫統上層,3×104/cm2的第3代BMSC置于下層.對共培養7d和14d後的BMSC行免疫組化染色,檢測神經細胞特異性蛋白巢蛋白(Nestin)、神經元類型Ⅲβ-微管蛋白(Tuj-1)和神經膠質纖維痠性蛋白(GFAP)的錶達情況.流式細胞儀檢測Nestin、Tuj-1和GFAP暘性細胞的分佈和所佔的比例.結果:免疫組化檢測顯示,共培養7d和14d後BMSC均錶達Nestin、Tuj-1和GFAP.流式細胞儀分析,共培養7d後Nestin、Tuj-1和GFAP暘性細胞比例分彆為46.3％、76.5％和23.2％,共培養14d後分彆為27.7％、89.1％和50％.結論:非接觸共培養條件下,OEC能誘導BMSC嚮神經樣細胞分化.
목적:관찰체외골수간충질간세포(BMSC)화후초세포(OEC)비접촉공배양시,OEC대BMSC향신경양세포유도분화적영향.방법:채용5～6주령、체중100g좌우적SPF급웅성Sprague Dawley (SD)품계대서20지,분리배양대서BMSC화OEC,BMSC취자쌍측고골,OEC취자후상피.사용6공0.4μm적Transwell공배양계통진행배양.장2×104/cm2적제3대OEC치우공배양계통상층,3×104/cm2적제3대BMSC치우하층.대공배양7d화14d후적BMSC행면역조화염색,검측신경세포특이성단백소단백(Nestin)、신경원류형Ⅲβ-미관단백(Tuj-1)화신경효질섬유산성단백(GFAP)적표체정황.류식세포의검측Nestin、Tuj-1화GFAP양성세포적분포화소점적비례.결과:면역조화검측현시,공배양7d화14d후BMSC균표체Nestin、Tuj-1화GFAP.류식세포의분석,공배양7d후Nestin、Tuj-1화GFAP양성세포비례분별위46.3％、76.5％화23.2％,공배양14d후분별위27.7％、89.1％화50％.결론:비접촉공배양조건하,OEC능유도BMSC향신경양세포분화.
