检验医学
檢驗醫學
검험의학
LABORATORY MEDICINE
2014年
9期
903-908
,共6页
何林燕%杨翠霞%王文涓%杜艳%刘鷖雯%何怡青%高锋
何林燕%楊翠霞%王文涓%杜豔%劉鷖雯%何怡青%高鋒
하림연%양취하%왕문연%두염%류예문%하이청%고봉
肿瘤相关巨噬细胞%乳腺癌%耐药%紫杉醇
腫瘤相關巨噬細胞%乳腺癌%耐藥%紫杉醇
종류상관거서세포%유선암%내약%자삼순
Tumor-associated macrophage%Breast cancer%Drug resistance%Paclitaxel
目的 探索肿瘤相关巨噬细胞(TAM)在乳腺肿瘤细胞耐药中的作用及其耐药机制.方法 通过佛波酯(PMA)、白细胞介素4(IL-4)、白细胞介素13(IL-13)刺激人单核细胞白血病细胞系THP-1,建立TAM模型在体外与乳腺癌细胞共培养,运用流式细胞术(FCM)检测TAM表面分子CD14、CD204;使用噻唑蓝(MTT)比色法检测紫杉醇对乳腺癌细胞系T47D、BT-549的有效杀伤浓度和时间,以及乳腺癌细胞单独培养、乳腺癌细胞与TAM/TAM上清共培养下乳腺癌细胞的杀伤;运用Western blot检测肿瘤细胞的磷酸化信号转导与转录激活因子3(p-STAT3)、磷酸化c-jun氨基末端激酶(p-JNK)信号通路变化.结果 THP-1细胞经PMA、IL-4、IL-13诱导分化为TAM,其细胞表面表达CD14、CD204(表达率分别为31.52％±9.39％、48.21％ ±8.76％).TAM/TAM上清与肿瘤细胞共培养均可显著削弱紫杉醇对肿瘤细胞的杀伤(T47D相对存活率由43.52％±9.40％提高至92.68％±2.32％/92.20％±2.10％,BT-549相对存活率由63.08％±2.71％提高至77.96％±2.64％ /79.55％±2.35％,P＜0.05),明显下调其凋亡信号p-JNK(P＜0.05),同时显著上调p-STAT3 (P ＜0.05).结论 成功建立TAM模型,TAM介导乳腺肿瘤细胞耐药,其机制可能与TAM分泌的细胞因子影响肿瘤细胞STAT3、JNK信号分子磷酸化有关.
目的 探索腫瘤相關巨噬細胞(TAM)在乳腺腫瘤細胞耐藥中的作用及其耐藥機製.方法 通過彿波酯(PMA)、白細胞介素4(IL-4)、白細胞介素13(IL-13)刺激人單覈細胞白血病細胞繫THP-1,建立TAM模型在體外與乳腺癌細胞共培養,運用流式細胞術(FCM)檢測TAM錶麵分子CD14、CD204;使用噻唑藍(MTT)比色法檢測紫杉醇對乳腺癌細胞繫T47D、BT-549的有效殺傷濃度和時間,以及乳腺癌細胞單獨培養、乳腺癌細胞與TAM/TAM上清共培養下乳腺癌細胞的殺傷;運用Western blot檢測腫瘤細胞的燐痠化信號轉導與轉錄激活因子3(p-STAT3)、燐痠化c-jun氨基末耑激酶(p-JNK)信號通路變化.結果 THP-1細胞經PMA、IL-4、IL-13誘導分化為TAM,其細胞錶麵錶達CD14、CD204(錶達率分彆為31.52％±9.39％、48.21％ ±8.76％).TAM/TAM上清與腫瘤細胞共培養均可顯著削弱紫杉醇對腫瘤細胞的殺傷(T47D相對存活率由43.52％±9.40％提高至92.68％±2.32％/92.20％±2.10％,BT-549相對存活率由63.08％±2.71％提高至77.96％±2.64％ /79.55％±2.35％,P＜0.05),明顯下調其凋亡信號p-JNK(P＜0.05),同時顯著上調p-STAT3 (P ＜0.05).結論 成功建立TAM模型,TAM介導乳腺腫瘤細胞耐藥,其機製可能與TAM分泌的細胞因子影響腫瘤細胞STAT3、JNK信號分子燐痠化有關.
목적 탐색종류상관거서세포(TAM)재유선종류세포내약중적작용급기내약궤제.방법 통과불파지(PMA)、백세포개소4(IL-4)、백세포개소13(IL-13)자격인단핵세포백혈병세포계THP-1,건립TAM모형재체외여유선암세포공배양,운용류식세포술(FCM)검측TAM표면분자CD14、CD204;사용새서람(MTT)비색법검측자삼순대유선암세포계T47D、BT-549적유효살상농도화시간,이급유선암세포단독배양、유선암세포여TAM/TAM상청공배양하유선암세포적살상;운용Western blot검측종류세포적린산화신호전도여전록격활인자3(p-STAT3)、린산화c-jun안기말단격매(p-JNK)신호통로변화.결과 THP-1세포경PMA、IL-4、IL-13유도분화위TAM,기세포표면표체CD14、CD204(표체솔분별위31.52％±9.39％、48.21％ ±8.76％).TAM/TAM상청여종류세포공배양균가현저삭약자삼순대종류세포적살상(T47D상대존활솔유43.52％±9.40％제고지92.68％±2.32％/92.20％±2.10％,BT-549상대존활솔유63.08％±2.71％제고지77.96％±2.64％ /79.55％±2.35％,P＜0.05),명현하조기조망신호p-JNK(P＜0.05),동시현저상조p-STAT3 (P ＜0.05).결론 성공건립TAM모형,TAM개도유선종류세포내약,기궤제가능여TAM분비적세포인자영향종류세포STAT3、JNK신호분자린산화유관.
