动物营养学报
動物營養學報
동물영양학보
ACTA ZOONUTRIMENTA SINICA
2014年
9期
2883-2891
,共9页
冯硕恒%谢奉军%蔡佐楠%麦康森%艾庆辉
馮碩恆%謝奉軍%蔡佐楠%麥康森%艾慶輝
풍석항%사봉군%채좌남%맥강삼%애경휘
大黄鱼%磷脂酶A2%克隆%磷脂%分解代谢%生长发育
大黃魚%燐脂酶A2%剋隆%燐脂%分解代謝%生長髮育
대황어%린지매A2%극륭%린지%분해대사%생장발육
large yellow croaker%cytosolic phospholipase A2%cloning%phospholipids%catabolism%growth development
利用同源克隆技术和cDNA末端快速扩增(RACE)技术克隆大黄鱼胞质型磷脂酶A2(cPLA2)基因的cDNA全长.此外,应用实时定量PCR法检测不同日龄大黄鱼仔稚鱼cPLA2基因的表达量.序列分析结果表明:cPLA2基因全长2 550 bp(GenBank登录号:KF006240.1),其中5'端非编码区176 bp,开放阅读框2 169 bp,3'端非编码区205 bp,共编码723个氨基酸.系统进化树分析结果表明:克隆所得大黄鱼cPLA2基因与其他鱼类的cPLA2基因亲缘关系较近,与哺乳动物的亲缘关系较远.定量检测结果表明:大黄鱼仔稚鱼cPLA2基因的表达量随日龄的增加为先显著升高(1、3、7日龄vs.15日龄,P＜0.05),在15日龄时达到最高值,随后显著下降(15日龄vs.19日龄,P＜0.05),之后趋于平稳.由此可知,大黄鱼从仔稚鱼到幼鱼早期的变形过程中,磷脂分解代谢的关键酶cPLA2基因的表达量呈现有规律的变化,这可能对机体保持体内磷脂的动态平衡、维护细胞膜的流动性具有重要的意义.大黄鱼仔稚鱼cPLA2基因表达量的变化趋势在一定程度上可以衡量大黄鱼消化系统的发育情况.
利用同源剋隆技術和cDNA末耑快速擴增(RACE)技術剋隆大黃魚胞質型燐脂酶A2(cPLA2)基因的cDNA全長.此外,應用實時定量PCR法檢測不同日齡大黃魚仔稚魚cPLA2基因的錶達量.序列分析結果錶明:cPLA2基因全長2 550 bp(GenBank登錄號:KF006240.1),其中5'耑非編碼區176 bp,開放閱讀框2 169 bp,3'耑非編碼區205 bp,共編碼723箇氨基痠.繫統進化樹分析結果錶明:剋隆所得大黃魚cPLA2基因與其他魚類的cPLA2基因親緣關繫較近,與哺乳動物的親緣關繫較遠.定量檢測結果錶明:大黃魚仔稚魚cPLA2基因的錶達量隨日齡的增加為先顯著升高(1、3、7日齡vs.15日齡,P＜0.05),在15日齡時達到最高值,隨後顯著下降(15日齡vs.19日齡,P＜0.05),之後趨于平穩.由此可知,大黃魚從仔稚魚到幼魚早期的變形過程中,燐脂分解代謝的關鍵酶cPLA2基因的錶達量呈現有規律的變化,這可能對機體保持體內燐脂的動態平衡、維護細胞膜的流動性具有重要的意義.大黃魚仔稚魚cPLA2基因錶達量的變化趨勢在一定程度上可以衡量大黃魚消化繫統的髮育情況.
이용동원극륭기술화cDNA말단쾌속확증(RACE)기술극륭대황어포질형린지매A2(cPLA2)기인적cDNA전장.차외,응용실시정량PCR법검측불동일령대황어자치어cPLA2기인적표체량.서렬분석결과표명:cPLA2기인전장2 550 bp(GenBank등록호:KF006240.1),기중5'단비편마구176 bp,개방열독광2 169 bp,3'단비편마구205 bp,공편마723개안기산.계통진화수분석결과표명:극륭소득대황어cPLA2기인여기타어류적cPLA2기인친연관계교근,여포유동물적친연관계교원.정량검측결과표명:대황어자치어cPLA2기인적표체량수일령적증가위선현저승고(1、3、7일령vs.15일령,P＜0.05),재15일령시체도최고치,수후현저하강(15일령vs.19일령,P＜0.05),지후추우평은.유차가지,대황어종자치어도유어조기적변형과정중,린지분해대사적관건매cPLA2기인적표체량정현유규률적변화,저가능대궤체보지체내린지적동태평형、유호세포막적류동성구유중요적의의.대황어자치어cPLA2기인표체량적변화추세재일정정도상가이형량대황어소화계통적발육정황.
