中国预防兽医学报
中國預防獸醫學報
중국예방수의학보
CHINESE JOURNAL OF PREVENTIVE VETERINARY MEDICINE
2014年
10期
780-783
,共4页
郑新添%黄其春%黄翠琴%汤小真%杨小燕
鄭新添%黃其春%黃翠琴%湯小真%楊小燕
정신첨%황기춘%황취금%탕소진%양소연
环介导等温扩增%猪流行性腹泻病毒%快速检测
環介導等溫擴增%豬流行性腹瀉病毒%快速檢測
배개도등온확증%저류행성복사병독%쾌속검측
LAMP%porcine epidemic diarrhea virus%quick detection
为建立一种快速、灵敏的检测猪流行性腹泻病毒(PEDV)的环介导等温扩增(LAMP)检测方法,本研究针对PEDV的NP基因设计LAMP引物,对反应体系优化并进行特异性及敏感性等试验.结果表明,该方法在65℃下恒温扩增60 min,经SYBR Green Ⅰ染色后仅肉眼观察即可判定结果.该方法特异性好,与传染性胃肠炎病毒、猪轮状病毒、猪瘟病毒及大肠杆菌等无交叉反应,对重组质粒最低检测限度为16拷贝/μL,灵敏度高于普通PCR.该LAMP检测方法特异性强,灵敏度高,操作方便,适于临床检测PEDV.
為建立一種快速、靈敏的檢測豬流行性腹瀉病毒(PEDV)的環介導等溫擴增(LAMP)檢測方法,本研究針對PEDV的NP基因設計LAMP引物,對反應體繫優化併進行特異性及敏感性等試驗.結果錶明,該方法在65℃下恆溫擴增60 min,經SYBR Green Ⅰ染色後僅肉眼觀察即可判定結果.該方法特異性好,與傳染性胃腸炎病毒、豬輪狀病毒、豬瘟病毒及大腸桿菌等無交扠反應,對重組質粒最低檢測限度為16拷貝/μL,靈敏度高于普通PCR.該LAMP檢測方法特異性彊,靈敏度高,操作方便,適于臨床檢測PEDV.
위건립일충쾌속、령민적검측저류행성복사병독(PEDV)적배개도등온확증(LAMP)검측방법,본연구침대PEDV적NP기인설계LAMP인물,대반응체계우화병진행특이성급민감성등시험.결과표명,해방법재65℃하항온확증60 min,경SYBR Green Ⅰ염색후부육안관찰즉가판정결과.해방법특이성호,여전염성위장염병독、저륜상병독、저온병독급대장간균등무교차반응,대중조질립최저검측한도위16고패/μL,령민도고우보통PCR.해LAMP검측방법특이성강,령민도고,조작방편,괄우림상검측PEDV.
