实用心脑肺血管病杂志
實用心腦肺血管病雜誌
실용심뇌폐혈관병잡지
PRACTICAL JOURNAL OF CARDIAC CEREBRAL PNEUMAL AND VASCULAR DISEASE
2014年
10期
26-27
,共2页
舒涛%丁彦%肖丽霞%谢斌辉
舒濤%丁彥%肖麗霞%謝斌輝
서도%정언%초려하%사빈휘
病毒,乙型肝炎%微RNAs%MicroRNA-21基因%肝细胞株
病毒,乙型肝炎%微RNAs%MicroRNA-21基因%肝細胞株
병독,을형간염%미RNAs%MicroRNA-21기인%간세포주
目的:探讨稳定表达乙型肝炎病毒 X(HBVX)和 MicroRNA -21基因肝细胞株的构建方法。方法应用 LE 培养基对大鼠肝细胞株进行培养,将 pcDNA 3.1- HBVX 质粒中的 HBVX 序列作为实验模板,采用 PCR 法对获得的目的基因 HBVX 片段进行扩增,构建稳定表达的 HBVX 和 MicroRNA -21基因肝细胞株。PCR 产物经琼脂糖凝胶电泳后观察 HBVX 基因克隆结果,鉴定 pcDNA 3.1(+)/ HBVX 重组质粒和 MicroRNA -21质粒。结果 PCR 产物HBVX基因片段中存在全部 HBVX 基因编码序列;RT - PCR 扩增产物经琼脂糖凝胶电泳后可见长度为300 bp 的 MicroR-NA -21前体片段。结论本研究成功构建了稳定表达 HBVX 和 MicroRNA -21基因肝细胞株,为临床进行深入研究提供了实验基础。
目的:探討穩定錶達乙型肝炎病毒 X(HBVX)和 MicroRNA -21基因肝細胞株的構建方法。方法應用 LE 培養基對大鼠肝細胞株進行培養,將 pcDNA 3.1- HBVX 質粒中的 HBVX 序列作為實驗模闆,採用 PCR 法對穫得的目的基因 HBVX 片段進行擴增,構建穩定錶達的 HBVX 和 MicroRNA -21基因肝細胞株。PCR 產物經瓊脂糖凝膠電泳後觀察 HBVX 基因剋隆結果,鑒定 pcDNA 3.1(+)/ HBVX 重組質粒和 MicroRNA -21質粒。結果 PCR 產物HBVX基因片段中存在全部 HBVX 基因編碼序列;RT - PCR 擴增產物經瓊脂糖凝膠電泳後可見長度為300 bp 的 MicroR-NA -21前體片段。結論本研究成功構建瞭穩定錶達 HBVX 和 MicroRNA -21基因肝細胞株,為臨床進行深入研究提供瞭實驗基礎。
목적:탐토은정표체을형간염병독 X(HBVX)화 MicroRNA -21기인간세포주적구건방법。방법응용 LE 배양기대대서간세포주진행배양,장 pcDNA 3.1- HBVX 질립중적 HBVX 서렬작위실험모판,채용 PCR 법대획득적목적기인 HBVX 편단진행확증,구건은정표체적 HBVX 화 MicroRNA -21기인간세포주。PCR 산물경경지당응효전영후관찰 HBVX 기인극륭결과,감정 pcDNA 3.1(+)/ HBVX 중조질립화 MicroRNA -21질립。결과 PCR 산물HBVX기인편단중존재전부 HBVX 기인편마서렬;RT - PCR 확증산물경경지당응효전영후가견장도위300 bp 적 MicroR-NA -21전체편단。결론본연구성공구건료은정표체 HBVX 화 MicroRNA -21기인간세포주,위림상진행심입연구제공료실험기출。