CAJ | 학술논문

为建立高效的海岛棉遗传转化体系,本实验以新疆海岛棉(Gossypium barbadense L.)品种新海13号、新海14号、新海16号茎尖为转化受体,采用农杆菌介导法,研究不同苗龄茎尖、菌液浓度、侵染时间及共培养时间对基因转化的影响,建立了农杆菌介导海岛棉茎尖遗传转化体系.最佳转化体系为:将生长4d的无菌苗茎尖浸入农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)菌液浓度OD600为0.5的菌液中,浸染10 min,共培养48～72 h后,移至卡那霉素浓度为150 mg/L的选择培养基进行筛选,25 d后转移到生根培养基培养,获得抗性苗,经嫁接或者直接移栽,获得29株抗性植株;经过PCR和RT-PCR检测,初步证明抗除草剂5-烯醇丙酮莽草酸-3-磷酸合酶基因(5-enolpyruvylshikimate-3-phosphate synthase,EPSPS)已导入海岛棉基因组中.该转化体系的建立为海岛棉的转基因育种提供了技术支持.
위건립고효적해도면유전전화체계,본실험이신강해도면(Gossypium barbadense L.)품충신해13호、신해14호、신해16호경첨위전화수체,채용농간균개도법,연구불동묘령경첨、균액농도、침염시간급공배양시간대기인전화적영향,건립료농간균개도해도면경첨유전전화체계.최가전화체계위:장생장4d적무균묘경첨침입농간균(Agrobacterium tumefaciens)균액농도OD600위0.5적균액중,침염10 min,공배양48～72 h후,이지잡나매소농도위150 mg/L적선택배양기진행사선,25 d후전이도생근배양기배양,획득항성묘,경가접혹자직접이재,획득29주항성식주;경과PCR화RT-PCR검측,초보증명항제초제5-희순병동망초산-3-린산합매기인(5-enolpyruvylshikimate-3-phosphate synthase,EPSPS)이도입해도면기인조중.해전화체계적건립위해도면적전기인육충제공료기술지지.