广西林业科学
廣西林業科學
엄서임업과학
GUANGXI FORESTRY SCIENCE
2014年
3期
257-263
,共7页
谢冬梅%陈国明%任翔%何德%李翠新
謝鼕梅%陳國明%任翔%何德%李翠新
사동매%진국명%임상%하덕%리취신
经典CTAB法%简易CTAB法%SDS微量法
經典CTAB法%簡易CTAB法%SDS微量法
경전CTAB법%간역CTAB법%SDS미량법
以华山松(Pinus armandi)种子胚乳为实验材料,分别采取经典CTAB法、简易CTAB法和SDS法微量法提取华山松基因组DNA,并通过琼脂糖凝胶电泳、紫外分光光度计分析、标准差和标准误、卡方检验和SPSS软件显著性分析,将它们在DNA产量、质量和方法稳定性等方面的优缺点进行总结.得出结论:通过对数据进行卡方检验,所有数据都是差异是由方法所引起的,不是偶然误差所引起的;相比于经典CTAB法,SDS微量法和简易CTAB法的(OD260-OD320)/(OD280-OD320)标准差和标准误相差不大,数据相对精确,结果相对精确;通过SPSS软件分析分析,简易CTAB法和其他2种方法相比存在显著差异性,SDS微量法与经典CTAB法的P >0.05,差异不显著,提取效果相差不大.综上所述:相比于简易CTAB法,SDS微量法与经典CTAB法的(OD260-OD320)/(OD280-OD320)都接近2.0,可能存在RNA污染污染,DNA的浓度也相对较低,SDS微量法与经典CTAB法不适合华山松胚乳DNA提取.简易CTAB法的(OD260-OD320)/(OD280-OD320)比率很接近1.80,不存在蛋白质和RNA污染,DNA纯度也最好,DNA浓度最高,比较适合华山松胚乳DNA提取.
以華山鬆(Pinus armandi)種子胚乳為實驗材料,分彆採取經典CTAB法、簡易CTAB法和SDS法微量法提取華山鬆基因組DNA,併通過瓊脂糖凝膠電泳、紫外分光光度計分析、標準差和標準誤、卡方檢驗和SPSS軟件顯著性分析,將它們在DNA產量、質量和方法穩定性等方麵的優缺點進行總結.得齣結論:通過對數據進行卡方檢驗,所有數據都是差異是由方法所引起的,不是偶然誤差所引起的;相比于經典CTAB法,SDS微量法和簡易CTAB法的(OD260-OD320)/(OD280-OD320)標準差和標準誤相差不大,數據相對精確,結果相對精確;通過SPSS軟件分析分析,簡易CTAB法和其他2種方法相比存在顯著差異性,SDS微量法與經典CTAB法的P >0.05,差異不顯著,提取效果相差不大.綜上所述:相比于簡易CTAB法,SDS微量法與經典CTAB法的(OD260-OD320)/(OD280-OD320)都接近2.0,可能存在RNA汙染汙染,DNA的濃度也相對較低,SDS微量法與經典CTAB法不適閤華山鬆胚乳DNA提取.簡易CTAB法的(OD260-OD320)/(OD280-OD320)比率很接近1.80,不存在蛋白質和RNA汙染,DNA純度也最好,DNA濃度最高,比較適閤華山鬆胚乳DNA提取.
이화산송(Pinus armandi)충자배유위실험재료,분별채취경전CTAB법、간역CTAB법화SDS법미량법제취화산송기인조DNA,병통과경지당응효전영、자외분광광도계분석、표준차화표준오、잡방검험화SPSS연건현저성분석,장타문재DNA산량、질량화방법은정성등방면적우결점진행총결.득출결론:통과대수거진행잡방검험,소유수거도시차이시유방법소인기적,불시우연오차소인기적;상비우경전CTAB법,SDS미량법화간역CTAB법적(OD260-OD320)/(OD280-OD320)표준차화표준오상차불대,수거상대정학,결과상대정학;통과SPSS연건분석분석,간역CTAB법화기타2충방법상비존재현저차이성,SDS미량법여경전CTAB법적P >0.05,차이불현저,제취효과상차불대.종상소술:상비우간역CTAB법,SDS미량법여경전CTAB법적(OD260-OD320)/(OD280-OD320)도접근2.0,가능존재RNA오염오염,DNA적농도야상대교저,SDS미량법여경전CTAB법불괄합화산송배유DNA제취.간역CTAB법적(OD260-OD320)/(OD280-OD320)비솔흔접근1.80,불존재단백질화RNA오염,DNA순도야최호,DNA농도최고,비교괄합화산송배유DNA제취.