江苏农业科学
江囌農業科學
강소농업과학
JIANGSU AGRICULTURAL SCIENCES
2014年
10期
42-44
,共3页
徐君%李静会%李欣%姜红卫
徐君%李靜會%李訢%薑紅衛
서군%리정회%리흔%강홍위
荷花%ISSR 引物筛选%体系优化
荷花%ISSR 引物篩選%體繫優化
하화%ISSR 인물사선%체계우화
利用加拿大哥伦比亚大学( UBC)公布的100条ISSR引物,以2个荷花品种的DNA为模板进行PCR扩增。采用单因素试验方法对荷花ISSR-PCR反应体系的5个因素( Mg2+、引物、dNTP、模板DNA、Taq酶)进行浓度优化,确定了荷花ISSR反应的25μL最佳扩增体系为:10× Taq Buffer 2. 5μL,Mg2+3.0 mmol/L,dNTP 0.2 mmol/L,引物1.0 μmol/L,Taq酶1.00 U,模板DNA 40 ng。筛选出8条扩增条带较好的ISSR引物,并对其引物进行梯度PCR试验,筛选出各引物对应的最佳退火温度,扩增共计获得61条ISSR条带。
利用加拿大哥倫比亞大學( UBC)公佈的100條ISSR引物,以2箇荷花品種的DNA為模闆進行PCR擴增。採用單因素試驗方法對荷花ISSR-PCR反應體繫的5箇因素( Mg2+、引物、dNTP、模闆DNA、Taq酶)進行濃度優化,確定瞭荷花ISSR反應的25μL最佳擴增體繫為:10× Taq Buffer 2. 5μL,Mg2+3.0 mmol/L,dNTP 0.2 mmol/L,引物1.0 μmol/L,Taq酶1.00 U,模闆DNA 40 ng。篩選齣8條擴增條帶較好的ISSR引物,併對其引物進行梯度PCR試驗,篩選齣各引物對應的最佳退火溫度,擴增共計穫得61條ISSR條帶。
이용가나대가륜비아대학( UBC)공포적100조ISSR인물,이2개하화품충적DNA위모판진행PCR확증。채용단인소시험방법대하화ISSR-PCR반응체계적5개인소( Mg2+、인물、dNTP、모판DNA、Taq매)진행농도우화,학정료하화ISSR반응적25μL최가확증체계위:10× Taq Buffer 2. 5μL,Mg2+3.0 mmol/L,dNTP 0.2 mmol/L,인물1.0 μmol/L,Taq매1.00 U,모판DNA 40 ng。사선출8조확증조대교호적ISSR인물,병대기인물진행제도PCR시험,사선출각인물대응적최가퇴화온도,확증공계획득61조ISSR조대。