江苏农业科学
江囌農業科學
강소농업과학
JIANGSU AGRICULTURAL SCIENCES
2014年
10期
17-20
,共4页
孙伟清%张昌轮%袁茜%梁建生%吕冰
孫偉清%張昌輪%袁茜%樑建生%呂冰
손위청%장창륜%원천%량건생%려빙
水稻%类整合素蛋白%过表达%转基因株系
水稻%類整閤素蛋白%過錶達%轉基因株繫
수도%류정합소단백%과표체%전기인주계
采用RT-PCR和TA克隆技术,从水稻品种日本晴中扩增出类整合素候选基因( integrin-like protein,ILP) OsILP的cDNA片段。经测序鉴定,克隆获得的目的片段长为1167 bp,包含完整的CDS,编码388个氨基酸,预测分子量43 ku。进而将该片段连接至表达载体 pTCK303中,通过 PCR 鉴定与酶切验证,结果表明成功构建了pTCK303-OsILP过表达载体。并将表达载体质粒转化为农杆菌EHA105,再通过农杆菌介导将其导入水稻日本晴的愈伤中,经遗传转化,阳性鉴定,获得了过表达转OsILP基因水稻株系。
採用RT-PCR和TA剋隆技術,從水稻品種日本晴中擴增齣類整閤素候選基因( integrin-like protein,ILP) OsILP的cDNA片段。經測序鑒定,剋隆穫得的目的片段長為1167 bp,包含完整的CDS,編碼388箇氨基痠,預測分子量43 ku。進而將該片段連接至錶達載體 pTCK303中,通過 PCR 鑒定與酶切驗證,結果錶明成功構建瞭pTCK303-OsILP過錶達載體。併將錶達載體質粒轉化為農桿菌EHA105,再通過農桿菌介導將其導入水稻日本晴的愈傷中,經遺傳轉化,暘性鑒定,穫得瞭過錶達轉OsILP基因水稻株繫。
채용RT-PCR화TA극륭기술,종수도품충일본청중확증출류정합소후선기인( integrin-like protein,ILP) OsILP적cDNA편단。경측서감정,극륭획득적목적편단장위1167 bp,포함완정적CDS,편마388개안기산,예측분자량43 ku。진이장해편단련접지표체재체 pTCK303중,통과 PCR 감정여매절험증,결과표명성공구건료pTCK303-OsILP과표체재체。병장표체재체질립전화위농간균EHA105,재통과농간균개도장기도입수도일본청적유상중,경유전전화,양성감정,획득료과표체전OsILP기인수도주계。