CAJ | 학술논문

目的:观察biglycan及血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)对结肠癌细胞系HCT116迁移、侵袭能力的影响并探讨其可能的机制.方法:在稳定转染biglycan的结肠癌细胞系HCT116中转染VEGF siRNA,实验设置未转染对照组(mock组)、空载质粒和非特异性干扰片段转染对照组(vector+ siRNA-NC组)、biglycan cDNA和非特异性干扰片段转染组(biglycan+ siRNA-NC组)以及biglycan cDNA和VEGF siRNA共转染组(biglycan+ siRNA-VEGF组).采用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测biglycan和VEGF的mRNA表达;采用划痕实验检测细胞的迁移能力;采用Transwell法检测细胞的侵袭能力;采用蛋白质印迹(Western blotting)法检测SNAIL、E-钙黏蛋白(E-cadherin)、波形蛋白(vimentin)、基质金属蛋白酶2(MMP-2)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)的表达;采用明胶酶谱法检测MMP-2、MMP-9的活性.结果:与mock组及vector+ siRNA-NC组比较,biglycan+ siRNA-NC组细胞的迁移、侵袭能力均显著提高(P＜0.05),vimentin、MMP-2、MMP-9、SNAIL蛋白的表达水平显著提高,E-cadherin蛋白的表达水平则显著下降(P＜0.05),MMP-2和MMP-9的活性显著提高(P＜0.05).与biglycan+ siRNA-NC组比较,biglycan+ siRNA-VEGF组细胞的迁移、侵袭能力均显著降低(P＜0.05),SNAIL、vimentin、MMP-2、MMP-9蛋白的表达水平均显著下降,E-cadherin蛋白的表达水平显著提高(P＜0.05),MMP-2、MMP-9的活性显著下降(P＜0.05).结论:biglycan通过促进VEGF的表达来促进结肠癌细胞系HCT116的迁移和侵袭,下调结肠癌细胞中VEGF的表达可逆转biglycan对HCT116迁移和侵袭的促进作用.
목적:관찰biglycan급혈관내피생장인자(vascular endothelial growth factor,VEGF)대결장암세포계HCT116천이、침습능력적영향병탐토기가능적궤제.방법:재은정전염biglycan적결장암세포계HCT116중전염VEGF siRNA,실험설치미전염대조조(mock조)、공재질립화비특이성간우편단전염대조조(vector+ siRNA-NC조)、biglycan cDNA화비특이성간우편단전염조(biglycan+ siRNA-NC조)이급biglycan cDNA화VEGF siRNA공전염조(biglycan+ siRNA-VEGF조).채용실시형광정량역전록취합매련반응(RT-PCR)법검측biglycan화VEGF적mRNA표체;채용화흔실험검측세포적천이능력;채용Transwell법검측세포적침습능력;채용단백질인적(Western blotting)법검측SNAIL、E-개점단백(E-cadherin)、파형단백(vimentin)、기질금속단백매2(MMP-2)、기질금속단백매-9(MMP-9)적표체;채용명효매보법검측MMP-2、MMP-9적활성.결과:여mock조급vector+ siRNA-NC조비교,biglycan+ siRNA-NC조세포적천이、침습능력균현저제고(P＜0.05),vimentin、MMP-2、MMP-9、SNAIL단백적표체수평현저제고,E-cadherin단백적표체수평칙현저하강(P＜0.05),MMP-2화MMP-9적활성현저제고(P＜0.05).여biglycan+ siRNA-NC조비교,biglycan+ siRNA-VEGF조세포적천이、침습능력균현저강저(P＜0.05),SNAIL、vimentin、MMP-2、MMP-9단백적표체수평균현저하강,E-cadherin단백적표체수평현저제고(P＜0.05),MMP-2、MMP-9적활성현저하강(P＜0.05).결론:biglycan통과촉진VEGF적표체래촉진결장암세포계HCT116적천이화침습,하조결장암세포중VEGF적표체가역전biglycan대HCT116천이화침습적촉진작용.