遵义医学院学报
遵義醫學院學報
준의의학원학보
ACTA ACADEMIAE MEDICINAE ZUNYI
2014年
5期
517-519,528
,共4页
李长福%梁大敏%束波%杨加伟%生欣%范芳
李長福%樑大敏%束波%楊加偉%生訢%範芳
리장복%량대민%속파%양가위%생흔%범방
DNA依赖性蛋白激酶催化亚基%多药耐药%Artemis
DNA依賴性蛋白激酶催化亞基%多藥耐藥%Artemis
DNA의뢰성단백격매최화아기%다약내약%Artemis
目的 利用RNA干扰技术探讨DNA-PKcs基因沉默影响肝癌细胞BEl7402/5-FU耐药性的机制.方法 将靶向DNA-PKcs的干扰质粒shDNA-PKcs转染肝癌耐药细胞BEL7402/5-FU,利用实时荧光定量PCR及Western blot法检铡转染干扰质粒后DNA-PKcs基因的沉默效率;Western blot检测Artemis、磷酸化Artemis蛋白水平的表达.结果 实时荧光定量PCR及Western blot检铡结果显示转染shDNA-PKcs后,DNA-PKcs mRNA及蛋白水平表达均下调(P＜0.05);Western blot检测结果显示shDNA-PKcs转染组Aaemis蛋白表达水平与对照组相比均有所降低(P＜0.05),磷酸化Anemis蛋白表达水平在转染前后无明显变化(P＞0.05).结论 ShDNA-PKs干扰质粒能抑制Bel-7402/5 FU细胞中DNA-PKcs、Artemis蛋白的表达、但对P-Artemis的表达无影响.
目的 利用RNA榦擾技術探討DNA-PKcs基因沉默影響肝癌細胞BEl7402/5-FU耐藥性的機製.方法 將靶嚮DNA-PKcs的榦擾質粒shDNA-PKcs轉染肝癌耐藥細胞BEL7402/5-FU,利用實時熒光定量PCR及Western blot法檢鍘轉染榦擾質粒後DNA-PKcs基因的沉默效率;Western blot檢測Artemis、燐痠化Artemis蛋白水平的錶達.結果 實時熒光定量PCR及Western blot檢鍘結果顯示轉染shDNA-PKcs後,DNA-PKcs mRNA及蛋白水平錶達均下調(P＜0.05);Western blot檢測結果顯示shDNA-PKcs轉染組Aaemis蛋白錶達水平與對照組相比均有所降低(P＜0.05),燐痠化Anemis蛋白錶達水平在轉染前後無明顯變化(P＞0.05).結論 ShDNA-PKs榦擾質粒能抑製Bel-7402/5 FU細胞中DNA-PKcs、Artemis蛋白的錶達、但對P-Artemis的錶達無影響.
목적 이용RNA간우기술탐토DNA-PKcs기인침묵영향간암세포BEl7402/5-FU내약성적궤제.방법 장파향DNA-PKcs적간우질립shDNA-PKcs전염간암내약세포BEL7402/5-FU,이용실시형광정량PCR급Western blot법검찰전염간우질립후DNA-PKcs기인적침묵효솔;Western blot검측Artemis、린산화Artemis단백수평적표체.결과 실시형광정량PCR급Western blot검찰결과현시전염shDNA-PKcs후,DNA-PKcs mRNA급단백수평표체균하조(P＜0.05);Western blot검측결과현시shDNA-PKcs전염조Aaemis단백표체수평여대조조상비균유소강저(P＜0.05),린산화Anemis단백표체수평재전염전후무명현변화(P＞0.05).결론 ShDNA-PKs간우질립능억제Bel-7402/5 FU세포중DNA-PKcs、Artemis단백적표체、단대P-Artemis적표체무영향.
