CAJ | 학술논문

目的:建立一种操作简便、重复性好的体外培养BALB/c小鼠原代肺上皮细胞(AEC)的方法,探究不同发育阶段小鼠AEC中柯萨奇病毒和腺病毒受体(CAR)表达量的变化,及其对小鼠原代AEC贴壁的作用.方法:手术获取小鼠肺组织,机械法剪碎肺组织,PBS缓冲液清洗肺组织块数次去血,联合使用链霉蛋白酶和胶原酶Ⅰ消化、分离肺组织块获得单细胞悬液,差速离心逐步清除其他种类的细胞,达到纯化AEC的作用.细胞在Ⅰ型鼠尾胶原蛋白包被过的细胞板中培养,光学显微镜下观察不同发育阶段AEC贴壁、生长状态;免疫荧光法鉴定AEC,检测AEC中CAR的表达量.结果:体外获得不同发育阶段BALB/c小鼠的原代AEC;胎鼠、幼鼠AEC贴壁并开始增殖所需时间较成体鼠短;胎鼠及幼鼠AEC中CAR的表达量明显较成体鼠高.结论:建立了稳定可重复的分离、纯化、体外培养小鼠原代AEC的方法,证明了AEC中的CAR可以促进原代AEC贴壁,为完善原代细胞培养方法提供了科学依据.
목적:건립일충조작간편、중복성호적체외배양BALB/c소서원대폐상피세포(AEC)적방법,탐구불동발육계단소서AEC중가살기병독화선병독수체(CAR)표체량적변화,급기대소서원대AEC첩벽적작용.방법:수술획취소서폐조직,궤계법전쇄폐조직,PBS완충액청세폐조직괴수차거혈,연합사용련매단백매화효원매Ⅰ소화、분리폐조직괴획득단세포현액,차속리심축보청제기타충류적세포,체도순화AEC적작용.세포재Ⅰ형서미효원단백포피과적세포판중배양,광학현미경하관찰불동발육계단AEC첩벽、생장상태;면역형광법감정AEC,검측AEC중CAR적표체량.결과:체외획득불동발육계단BALB/c소서적원대AEC;태서、유서AEC첩벽병개시증식소수시간교성체서단;태서급유서AEC중CAR적표체량명현교성체서고.결론:건립료은정가중복적분리、순화、체외배양소서원대AEC적방법,증명료AEC중적CAR가이촉진원대AEC첩벽,위완선원대세포배양방법제공료과학의거.