生物技术通讯
生物技術通訊
생물기술통신
LETTERS IN BIOTECHNOLOGY
2014年
5期
632-635
,共4页
李大攀%葛欣%魏静远%熊向华%汪建华%杨秀萍%张惟材
李大攀%葛訢%魏靜遠%熊嚮華%汪建華%楊秀萍%張惟材
리대반%갈흔%위정원%웅향화%왕건화%양수평%장유재
甲基营养菌%甲醇脱氢酶%基因敲除%吡咯喹啉醌
甲基營養菌%甲醇脫氫酶%基因敲除%吡咯喹啉醌
갑기영양균%갑순탈경매%기인고제%필각규람곤
Methylovorus%methanol dehydrogenase%gene knockout%pyrroloquinoline quinine
目的:研究甲醇脱氢酶基因mpq1818在甲基营养菌MP688生长代谢中的作用.方法:利用同源重组原理构建中间为庆大霉素抗性基因Gmr、两侧mpq1818基因上下游序列同源的敲除载体pAK0-up-Gmr-down,接合转移导入MP688,通过庆大霉素抗性和组合PCR方法筛选基因敲除菌,并检测其生长、甲醇脱氢酶活性、甲醇利用及吡咯喹啉醌(PQQ)生物合成能力等方面的差异.结果:抗性和PCR验证显示mpq1818缺失株构建成功;与野生菌相比,缺失株的甲醇脱氢酶活力及利用甲醇的能力降低,而且菌株的生长和PQQ产量也有显著下降.结论:基因mpq1818的缺失影响菌株前期生长与PQQ合成.
目的:研究甲醇脫氫酶基因mpq1818在甲基營養菌MP688生長代謝中的作用.方法:利用同源重組原理構建中間為慶大黴素抗性基因Gmr、兩側mpq1818基因上下遊序列同源的敲除載體pAK0-up-Gmr-down,接閤轉移導入MP688,通過慶大黴素抗性和組閤PCR方法篩選基因敲除菌,併檢測其生長、甲醇脫氫酶活性、甲醇利用及吡咯喹啉醌(PQQ)生物閤成能力等方麵的差異.結果:抗性和PCR驗證顯示mpq1818缺失株構建成功;與野生菌相比,缺失株的甲醇脫氫酶活力及利用甲醇的能力降低,而且菌株的生長和PQQ產量也有顯著下降.結論:基因mpq1818的缺失影響菌株前期生長與PQQ閤成.
목적:연구갑순탈경매기인mpq1818재갑기영양균MP688생장대사중적작용.방법:이용동원중조원리구건중간위경대매소항성기인Gmr、량측mpq1818기인상하유서렬동원적고제재체pAK0-up-Gmr-down,접합전이도입MP688,통과경대매소항성화조합PCR방법사선기인고제균,병검측기생장、갑순탈경매활성、갑순이용급필각규람곤(PQQ)생물합성능력등방면적차이.결과:항성화PCR험증현시mpq1818결실주구건성공;여야생균상비,결실주적갑순탈경매활력급이용갑순적능력강저,이차균주적생장화PQQ산량야유현저하강.결론:기인mpq1818적결실영향균주전기생장여PQQ합성.
