人FOXO3a基因真核表达载体的构建及其功能验证
인FOXO3a기인진핵표체재체적구건급기공능험증
Construction of myc-Tagged Human FOXO3a Eukaryotic Expression Vector and Detection of its Biological Function
  • 万方数据
    生物技术通讯 생물기술통신
    LETTERS IN BIOTECHNOLOGY
    2014年 5期 625-627,648 ,共4页

    郭芸菲%王涛%徐小洁%周丽英%梁迎春%冯滢滢%李玲%郭靖%叶棋浓

    곽예비%왕도%서소길%주려영%량영춘%풍형형%리령%곽정%협기농

    人FOXO3a基因%克隆%真核表达 人FOXO3a基因%剋隆%真覈錶達
    인FOXO3a기인%극륭%진핵표체
    human FOXO3 gene%cloning%eukaryotic expression
    目的:构建带myc标签的人FOXO3a基因真核表达载体,并对其功能进行初步检测.方法:采用PCR技术,从乳腺文库中扩增人FOXO3a基因,并将其正确插入pXJ-40-myc载体;将重组质粒与空载体分别转染人乳腺癌细胞系ZR75-1、MCF-7后,通过Western印迹检测其表达情况,并用CCK8法测定细胞生长曲线.结果:双酶切和测序鉴定表明myc-FOXO3a真核表达质粒构建成功,转染乳腺癌ZR75-1、MCF-7细胞后目的基因成功表达;细胞生长曲线结果显示,转染myc-FOXO3a的乳腺癌细胞较空载体细胞生长较慢.结论:构建了带myc标签的人FOXO3a基因真核表达载体,为进一步研究FOXO3a在乳腺癌中的功能奠定了基础.
    목적:구건대myc표첨적인FOXO3a기인진핵표체재체,병대기공능진행초보검측.방법:채용PCR기술,종유선문고중확증인FOXO3a기인,병장기정학삽입pXJ-40-myc재체;장중조질립여공재체분별전염인유선암세포계ZR75-1、MCF-7후,통과Western인적검측기표체정황,병용CCK8법측정세포생장곡선.결과:쌍매절화측서감정표명myc-FOXO3a진핵표체질립구건성공,전염유선암ZR75-1、MCF-7세포후목적기인성공표체;세포생장곡선결과현시,전염myc-FOXO3a적유선암세포교공재체세포생장교만.결론:구건료대myc표첨적인FOXO3a기인진핵표체재체,위진일보연구FOXO3a재유선암중적공능전정료기출.
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