生殖医学杂志
生殖醫學雜誌
생식의학잡지
JOURNAL OF REPRODUCTIVE MEDICINE
2014年
10期
838-842
,共5页
张瑶楠%丁宁%石心泉%贾孟春%刘美玲
張瑤楠%丁寧%石心泉%賈孟春%劉美玲
장요남%정저%석심천%가맹춘%류미령
Spyda基因%转基因小鼠%实时荧光定量PCR%纯合子
Spyda基因%轉基因小鼠%實時熒光定量PCR%純閤子
Spyda기인%전기인소서%실시형광정량PCR%순합자
Spyda%Transgenic mouse%Real-time PCR%Homozygote
目的 建立Spyda基因过表达转基因小鼠品系用于深入研究Spyda基因的功能. 方法 利用Gateway技术构建Spyda表达载体,通过DNA显微注射的方式获得Spyda基因过表达的首建鼠.首建鼠与野生型鼠杂交,所得子代中的阳性鼠同窝交配,已传3代以后的阳性小鼠经SYBR Green实时荧光定量PCR方法检测外源基因的起始模板量,通过与杂合子比较来预测小鼠的基因型,再用传统育种方式验证SYBR Green实时荧光定量PCR的结果. 结果 获得7只首建鼠,通过与野生型鼠杂交获得阳性子代,进行同窝交配,传至第3代,经实时荧光定量PCR方法筛选出4只纯合子的小鼠,经测交验证,其与正常小鼠交配所生的后代均为阳性,证明实时定量PCR的结果是正确的.建立了2个独立的Spyda转基因小鼠纯合子品系. 结论 建立了稳定遗传的纯合子Spyda基因过表达转基因小鼠品系,可作为工具鼠进一步深入研究Spyda基因的功能.
目的 建立Spyda基因過錶達轉基因小鼠品繫用于深入研究Spyda基因的功能. 方法 利用Gateway技術構建Spyda錶達載體,通過DNA顯微註射的方式穫得Spyda基因過錶達的首建鼠.首建鼠與野生型鼠雜交,所得子代中的暘性鼠同窩交配,已傳3代以後的暘性小鼠經SYBR Green實時熒光定量PCR方法檢測外源基因的起始模闆量,通過與雜閤子比較來預測小鼠的基因型,再用傳統育種方式驗證SYBR Green實時熒光定量PCR的結果. 結果 穫得7隻首建鼠,通過與野生型鼠雜交穫得暘性子代,進行同窩交配,傳至第3代,經實時熒光定量PCR方法篩選齣4隻純閤子的小鼠,經測交驗證,其與正常小鼠交配所生的後代均為暘性,證明實時定量PCR的結果是正確的.建立瞭2箇獨立的Spyda轉基因小鼠純閤子品繫. 結論 建立瞭穩定遺傳的純閤子Spyda基因過錶達轉基因小鼠品繫,可作為工具鼠進一步深入研究Spyda基因的功能.
목적 건립Spyda기인과표체전기인소서품계용우심입연구Spyda기인적공능. 방법 이용Gateway기술구건Spyda표체재체,통과DNA현미주사적방식획득Spyda기인과표체적수건서.수건서여야생형서잡교,소득자대중적양성서동와교배,이전3대이후적양성소서경SYBR Green실시형광정량PCR방법검측외원기인적기시모판량,통과여잡합자비교래예측소서적기인형,재용전통육충방식험증SYBR Green실시형광정량PCR적결과. 결과 획득7지수건서,통과여야생형서잡교획득양성자대,진행동와교배,전지제3대,경실시형광정량PCR방법사선출4지순합자적소서,경측교험증,기여정상소서교배소생적후대균위양성,증명실시정량PCR적결과시정학적.건립료2개독립적Spyda전기인소서순합자품계. 결론 건립료은정유전적순합자Spyda기인과표체전기인소서품계,가작위공구서진일보심입연구Spyda기인적공능.
