食品科学
食品科學
식품과학
FOOD SCIENCE
2014年
20期
180-184
,共5页
陈静廷%卜登攀%马露%杨永新%李发弟
陳靜廷%蔔登攀%馬露%楊永新%李髮弟
진정정%복등반%마로%양영신%리발제
牛奶%乳清蛋白%等电沉淀%超速离心%提取方法%双向凝胶电泳图谱
牛奶%乳清蛋白%等電沉澱%超速離心%提取方法%雙嚮凝膠電泳圖譜
우내%유청단백%등전침정%초속리심%제취방법%쌍향응효전영도보
cow milk%whey protein%isoelectric precipitation%ultracentrifugation%extraction methods%two-dimensional electrophoresis map
为探索牛奶乳清蛋白提取的最适方法,以生鲜荷斯坦牛奶为对象,采用不同等电点(pH 4.6和pH 4.8)沉淀法和超速离心法提取牛奶乳清蛋白样品,并对提取效果进行双向凝胶电泳(two-dimensional electrophoresis,2-DE)图谱分析.依据凝胶图谱上蛋白斑点比较图谱质量,采用PDQuest 8.0凝胶图像分析软件进行凝胶图谱分析.结果显示:2种方法均能有效提取牛奶乳清蛋白,且获得的2-DE凝胶图谱背景清晰、蛋白点个体独立、无明显的拖尾现象,且重复性强,但都存在一定的酪蛋白残留.与超速离心法相比,pH 4.6沉淀法和pH 4.8沉淀法提取乳清蛋白的2-DE凝胶图谱可检测到较多的蛋白质斑点.pH 4.6沉淀法提取乳清蛋白制备的2-DE凝胶图谱中蛋白点的表达丰度略高于pH 4.8沉淀法.研究表明:pH 4.6沉淀法提取乳清蛋白制备2-DE凝胶图谱略优于pH 4.8沉淀法和超速离心法.但2种等电点沉淀法和超速离心法都可有效去除牛奶中的高丰度酪蛋白,提高低丰度蛋白的检出敏感性.
為探索牛奶乳清蛋白提取的最適方法,以生鮮荷斯坦牛奶為對象,採用不同等電點(pH 4.6和pH 4.8)沉澱法和超速離心法提取牛奶乳清蛋白樣品,併對提取效果進行雙嚮凝膠電泳(two-dimensional electrophoresis,2-DE)圖譜分析.依據凝膠圖譜上蛋白斑點比較圖譜質量,採用PDQuest 8.0凝膠圖像分析軟件進行凝膠圖譜分析.結果顯示:2種方法均能有效提取牛奶乳清蛋白,且穫得的2-DE凝膠圖譜揹景清晰、蛋白點箇體獨立、無明顯的拖尾現象,且重複性彊,但都存在一定的酪蛋白殘留.與超速離心法相比,pH 4.6沉澱法和pH 4.8沉澱法提取乳清蛋白的2-DE凝膠圖譜可檢測到較多的蛋白質斑點.pH 4.6沉澱法提取乳清蛋白製備的2-DE凝膠圖譜中蛋白點的錶達豐度略高于pH 4.8沉澱法.研究錶明:pH 4.6沉澱法提取乳清蛋白製備2-DE凝膠圖譜略優于pH 4.8沉澱法和超速離心法.但2種等電點沉澱法和超速離心法都可有效去除牛奶中的高豐度酪蛋白,提高低豐度蛋白的檢齣敏感性.
위탐색우내유청단백제취적최괄방법,이생선하사탄우내위대상,채용불동등전점(pH 4.6화pH 4.8)침정법화초속리심법제취우내유청단백양품,병대제취효과진행쌍향응효전영(two-dimensional electrophoresis,2-DE)도보분석.의거응효도보상단백반점비교도보질량,채용PDQuest 8.0응효도상분석연건진행응효도보분석.결과현시:2충방법균능유효제취우내유청단백,차획득적2-DE응효도보배경청석、단백점개체독립、무명현적타미현상,차중복성강,단도존재일정적락단백잔류.여초속리심법상비,pH 4.6침정법화pH 4.8침정법제취유청단백적2-DE응효도보가검측도교다적단백질반점.pH 4.6침정법제취유청단백제비적2-DE응효도보중단백점적표체봉도략고우pH 4.8침정법.연구표명:pH 4.6침정법제취유청단백제비2-DE응효도보략우우pH 4.8침정법화초속리심법.단2충등전점침정법화초속리심법도가유효거제우내중적고봉도락단백,제고저봉도단백적검출민감성.
