中华临床医师杂志（电子版）
中華臨床醫師雜誌（電子版）
중화림상의사잡지（전자판）
CHINESE JOURNAL OF CLINICIANS(ELECTRONIC VERSION)
2014年
22期
4045-4050
,共6页
王靖淞%王慧%谢敏%王若雨
王靖淞%王慧%謝敏%王若雨
왕정송%왕혜%사민%왕약우
X线照射%CNE1细胞%DNA双链损伤%MRE11基因
X線照射%CNE1細胞%DNA雙鏈損傷%MRE11基因
X선조사%CNE1세포%DNA쌍련손상%MRE11기인
X-irradiation%CNE1 cells%DNA double-stranded breaks%MRE11 protein
目的：研究X射线照射后肿瘤细胞中MRE11基因及其蛋白表达的规律，并探讨其与肿瘤放疗失败的相关性，为提高肿瘤放射治疗疗效开辟新途径，提供新的靶点。方法选取人鼻咽癌CNE1细胞株进行体外培养及X线照射。按单次照射0 Gy、2 Gy、4 Gy、6 Gy、8 Gy剂量分组，照射后4 h收集，利用RT-PCR技术检测MRE11mRNA的表达；CNE1细胞株单次照射4 Gy于0 h、1.5 h、4 h、6 h、8 h、12 h、24 h时间点收集固定，利用免疫荧光技术检测MRE11蛋白的表达，并采用Image-Pro Plus 5.0软件分析测定各组荧光的平均光密度值（mOD）。结果RT-PCR检测CNE1细胞株分别经0 Gy、2 Gy、4 Gy、6 Gy、8 Gy X线照射后4 h，各组之间MRE11 mRNA表达无统计学差异。免疫荧光技术检测CNE1细胞株经4 Gy X线照射后0 h、1.5 h、4 h、6 h、8 h、12 h、24 h时间点MRE11蛋白的表达，荧光强度先增强后减弱，4 h荧光强度最强。结论CNE1细胞株MRE11 mRNA的表达与X线照射剂量递增无相关性。但CNE1细胞株经X线照射后MRE11蛋白的表达随时间的延长先增强后减弱，且在照射4 h表达最强，24 h后恢复到未照射水平。
目的：研究X射線照射後腫瘤細胞中MRE11基因及其蛋白錶達的規律，併探討其與腫瘤放療失敗的相關性，為提高腫瘤放射治療療效開闢新途徑，提供新的靶點。方法選取人鼻嚥癌CNE1細胞株進行體外培養及X線照射。按單次照射0 Gy、2 Gy、4 Gy、6 Gy、8 Gy劑量分組，照射後4 h收集，利用RT-PCR技術檢測MRE11mRNA的錶達；CNE1細胞株單次照射4 Gy于0 h、1.5 h、4 h、6 h、8 h、12 h、24 h時間點收集固定，利用免疫熒光技術檢測MRE11蛋白的錶達，併採用Image-Pro Plus 5.0軟件分析測定各組熒光的平均光密度值（mOD）。結果RT-PCR檢測CNE1細胞株分彆經0 Gy、2 Gy、4 Gy、6 Gy、8 Gy X線照射後4 h，各組之間MRE11 mRNA錶達無統計學差異。免疫熒光技術檢測CNE1細胞株經4 Gy X線照射後0 h、1.5 h、4 h、6 h、8 h、12 h、24 h時間點MRE11蛋白的錶達，熒光彊度先增彊後減弱，4 h熒光彊度最彊。結論CNE1細胞株MRE11 mRNA的錶達與X線照射劑量遞增無相關性。但CNE1細胞株經X線照射後MRE11蛋白的錶達隨時間的延長先增彊後減弱，且在照射4 h錶達最彊，24 h後恢複到未照射水平。
목적：연구X사선조사후종류세포중MRE11기인급기단백표체적규률，병탐토기여종류방료실패적상관성，위제고종류방사치료료효개벽신도경，제공신적파점。방법선취인비인암CNE1세포주진행체외배양급X선조사。안단차조사0 Gy、2 Gy、4 Gy、6 Gy、8 Gy제량분조，조사후4 h수집，이용RT-PCR기술검측MRE11mRNA적표체；CNE1세포주단차조사4 Gy우0 h、1.5 h、4 h、6 h、8 h、12 h、24 h시간점수집고정，이용면역형광기술검측MRE11단백적표체，병채용Image-Pro Plus 5.0연건분석측정각조형광적평균광밀도치（mOD）。결과RT-PCR검측CNE1세포주분별경0 Gy、2 Gy、4 Gy、6 Gy、8 Gy X선조사후4 h，각조지간MRE11 mRNA표체무통계학차이。면역형광기술검측CNE1세포주경4 Gy X선조사후0 h、1.5 h、4 h、6 h、8 h、12 h、24 h시간점MRE11단백적표체，형광강도선증강후감약，4 h형광강도최강。결론CNE1세포주MRE11 mRNA적표체여X선조사제량체증무상관성。단CNE1세포주경X선조사후MRE11단백적표체수시간적연장선증강후감약，차재조사4 h표체최강，24 h후회복도미조사수평。
ObjectiveTo investigate the effect of X-ray irradiation on the expression of MRE11 in nasopharyngeal carcinoma cell line CNE1, understand the correlation between MRE11 expression and failure of radiotherapy, which will provide a new target for improving the efficacy of radio-therapy. MethodsThe expression of MRE11 mRNA in CNE1 cells was analyzed by RT-PCR after exposure to 0 Gy, 2 Gy, 4 Gy, 6 Gy and 8 Gy of ionizing radiation. The expression of MRE11 protein in CNE1 cells was analyzed by immunofluorescence assay before and after 4 Gy X-ray exposure at different time points, such as 0 h, 1.5 h, 4 h, 6 h, 8 h, 12 h, and 24 h.ResultsThe semi-quantitative OD values of MRE11 mRNA were 1.1±0.43, 0.87±0.42, 0.81±0.32, 0.87±0.48, and 0.83±0.21 after 0 Gy, 2 Gy, 4 Gy, 6 Gy, 8 Gy irradiation, respectively. The expression of MRE11 mRNA had not statistically significance between each group. Immunofluorescence assay showed MRE11 expression after irradiation by 4 Gy at 0 h, 1.5 h, 4 h, 6 h, 8 h, 12 h and 24 h time points was increased and then decreased. The strongest point of fluorescent intensity was at 4-hour time point.ConclusionThe expression of MRE11 mRNA in CNE1 cell lines was independent of X-ray dose escalation. But MRE11 protein expression increased first and then decreased, and at 4 h time point after X-radiation expressed the strongest.
