CAJ | 학술논문

目的:初步探讨磷脂酰肌醇3激酶调节亚基(PIK3R1)在肝癌发生发展中的生物学作用及其机制.方法:首先通过蛋白质印迹法和免疫组织化学法检测p85α(PIK3R1所编码的蛋白)在肝癌组织标本中的表达情况;接着利用脂质体转染法将PIK3R1的小分子干扰RNA(siRNA)和含有PIK3R1 cDNA的重组质粒转染入HepG2细胞中,并利用实时定量PCR检测其干扰效率和过表达效率;采用MTT法和集落形成实验检测PIK3R1对细胞增殖的影响,应用流式细胞术分析PIK3R1对细胞周期的影响;最后蛋白质印迹法检测PI3K/AKT信号通路下游效应分子的表达变化.结果:p85α在肝癌组织中的表达高于其癌旁组织,差异有统计学意义(P ＜0.05);PIK3R1被干扰后,HepG2细胞增殖速度减慢,集落形成率减少,差异有统计学意义(均P ＜0.05);PIK3R1过表达后,HepG2细胞增殖速度加快,集落形成率增多,差异有统计学意义(均P＜0.05);PIK3R1提高了HepG2细胞中S期细胞的比例(P＜0.01);且PIK3R1可提高PI3 K/A KT通路下游效应分子p-AKT的水平,并降低p53的水平.结论:PIK3R1在肝癌组织中表达上调,PIK3R1可能通过激活PI3K/AKT信号通路促进HepG2细胞的增殖.
목적:초보탐토린지선기순3격매조절아기(PIK3R1)재간암발생발전중적생물학작용급기궤제.방법:수선통과단백질인적법화면역조직화학법검측p85α(PIK3R1소편마적단백)재간암조직표본중적표체정황;접착이용지질체전염법장PIK3R1적소분자간우RNA(siRNA)화함유PIK3R1 cDNA적중조질립전염입HepG2세포중,병이용실시정량PCR검측기간우효솔화과표체효솔;채용MTT법화집락형성실험검측PIK3R1대세포증식적영향,응용류식세포술분석PIK3R1대세포주기적영향;최후단백질인적법검측PI3K/AKT신호통로하유효응분자적표체변화.결과:p85α재간암조직중적표체고우기암방조직,차이유통계학의의(P ＜0.05);PIK3R1피간우후,HepG2세포증식속도감만,집락형성솔감소,차이유통계학의의(균P ＜0.05);PIK3R1과표체후,HepG2세포증식속도가쾌,집락형성솔증다,차이유통계학의의(균P＜0.05);PIK3R1제고료HepG2세포중S기세포적비례(P＜0.01);차PIK3R1가제고PI3 K/A KT통로하유효응분자p-AKT적수평,병강저p53적수평.결론:PIK3R1재간암조직중표체상조,PIK3R1가능통과격활PI3K/AKT신호통로촉진HepG2세포적증식.