浙江大学学报（医学版）
浙江大學學報（醫學版）
절강대학학보（의학판）
JOURNAL OF ZHEJIANG UNIVERSITY MEDICAL SCIENCES
2014年
5期
553-558
,共6页
吴俊琪%石佳%董剑峰%蒋亦秀%庄顺红%杨军
吳俊琪%石佳%董劍峰%蔣亦秀%莊順紅%楊軍
오준기%석가%동검봉%장역수%장순홍%양군
白癜风%HLA-A抗原%β2微球蛋白%抗原抗体复合物%T淋巴细胞,细胞毒性%聚合物%肽类
白癜風%HLA-A抗原%β2微毬蛋白%抗原抗體複閤物%T淋巴細胞,細胞毒性%聚閤物%肽類
백전풍%HLA-A항원%β2미구단백%항원항체복합물%T림파세포,세포독성%취합물%태류
Vitiligo%HLA-A antigens%beta 2-microglobulin%Antigen-antibody complex%T-lymphocytes,Cytotoxic%Polymers%Peptides
目的:体外构建三种白癜风抗原肽HLA-A * 0201复合物四聚体,并用其检测白癜风患者外周血中抗原特异性细胞毒性CD8+T细胞(CTL).方法:取原核表达HLA0201*-BSP和β2M蛋白,分别同MelanA 26-35、gp100 209-217、tyrosinase 1-9三种白癜风抗原肽进行体外复性折叠,形成可溶性抗原肽HLA-A*0201复合物,经BirA酶作用并通过凝胶过滤层析法纯化得复合物单体,再与藻红蛋白标记的链霉亲合素按4:1比例耦合成四聚体,并采用斑点印迹法对上述构建的四聚体进行鉴定.运用流式细胞术检测分析该四聚体结合白癜风患者外周血中特异性CTL的能力.结果:斑点印迹检测显示三种具有天然构象的生物素化的白癜风抗原肽HLA-A*0201四聚体复合物构建成功;流式细胞术检测结果显示所制备的四聚体可与白癜风患者血液中抗原特异性CTL结合.结论:成功制备了三种具有完整构象的生物素化白癜风抗原肽HLA-A* 0201四聚体,此四聚体均可检测白癜风抗原特异性CTL.
目的:體外構建三種白癜風抗原肽HLA-A * 0201複閤物四聚體,併用其檢測白癜風患者外週血中抗原特異性細胞毒性CD8+T細胞(CTL).方法:取原覈錶達HLA0201*-BSP和β2M蛋白,分彆同MelanA 26-35、gp100 209-217、tyrosinase 1-9三種白癜風抗原肽進行體外複性摺疊,形成可溶性抗原肽HLA-A*0201複閤物,經BirA酶作用併通過凝膠過濾層析法純化得複閤物單體,再與藻紅蛋白標記的鏈黴親閤素按4:1比例耦閤成四聚體,併採用斑點印跡法對上述構建的四聚體進行鑒定.運用流式細胞術檢測分析該四聚體結閤白癜風患者外週血中特異性CTL的能力.結果:斑點印跡檢測顯示三種具有天然構象的生物素化的白癜風抗原肽HLA-A*0201四聚體複閤物構建成功;流式細胞術檢測結果顯示所製備的四聚體可與白癜風患者血液中抗原特異性CTL結閤.結論:成功製備瞭三種具有完整構象的生物素化白癜風抗原肽HLA-A* 0201四聚體,此四聚體均可檢測白癜風抗原特異性CTL.
목적:체외구건삼충백전풍항원태HLA-A * 0201복합물사취체,병용기검측백전풍환자외주혈중항원특이성세포독성CD8+T세포(CTL).방법:취원핵표체HLA0201*-BSP화β2M단백,분별동MelanA 26-35、gp100 209-217、tyrosinase 1-9삼충백전풍항원태진행체외복성절첩,형성가용성항원태HLA-A*0201복합물,경BirA매작용병통과응효과려층석법순화득복합물단체,재여조홍단백표기적련매친합소안4:1비례우합성사취체,병채용반점인적법대상술구건적사취체진행감정.운용류식세포술검측분석해사취체결합백전풍환자외주혈중특이성CTL적능력.결과:반점인적검측현시삼충구유천연구상적생물소화적백전풍항원태HLA-A*0201사취체복합물구건성공;류식세포술검측결과현시소제비적사취체가여백전풍환자혈액중항원특이성CTL결합.결론:성공제비료삼충구유완정구상적생물소화백전풍항원태HLA-A* 0201사취체,차사취체균가검측백전풍항원특이성CTL.
