CAJ | 학술논문

本研究探讨MEK抑制剂AZD8330对多发性骨髓瘤细胞IM9及NCI-H929细胞增殖、凋亡的影响及其可能的作用机制.使用不同浓度AZD8330处理NCI-H929及IM9细胞48 h,用CCK-8检测细胞活力,并计算出48 h的IC50;分别用5、10及100 nmol/L的AZD8330处理上述两种细胞,然后用PI标记流式细胞术分析细胞周期的变化;Western blot方法检测细胞周期相关蛋白cyclin D及cyclin E;分别用10、100、1000及2000 nmol/L的AZD8330处理骨髓瘤细胞,AnnexinV/7-AAD双标记法分析细胞凋亡,并应用Western blot方法检测凋亡相关蛋白caspase-3.结果表明,AZD8330可显著抑制NCI-H929及IM9的细胞活力,且抑制效应呈一定的时间和剂量依赖性,IM9细胞48 h的半数抑制浓度(IC50)为19.88±2.7 nmol/L,NCI-H929细胞48 h的半数抑制浓度(IC50)为29.3±2.03 nmol/L.细胞周期结果显示,两种骨髓瘤细胞均发生G1期阻滞;AZD8330处理后cyclin D水平显著增高,但是cyclin E水平降低,促使细胞发生G1期阻滞.AnnexinV/7-AAD结果显示,随着AZD8330浓度增加,细胞凋亡数量也相应增多,并且活化的caspase-3蛋白水平增高.结论:MEK抑制剂AZD8330可有效抑制骨髓瘤细胞NCI-H929和IM9的增殖,使细胞周期阻滞于G1期,并促进细胞发生凋亡.
본연구탐토MEK억제제AZD8330대다발성골수류세포IM9급NCI-H929세포증식、조망적영향급기가능적작용궤제.사용불동농도AZD8330처리NCI-H929급IM9세포48 h,용CCK-8검측세포활력,병계산출48 h적IC50;분별용5、10급100 nmol/L적AZD8330처리상술량충세포,연후용PI표기류식세포술분석세포주기적변화;Western blot방법검측세포주기상관단백cyclin D급cyclin E;분별용10、100、1000급2000 nmol/L적AZD8330처리골수류세포,AnnexinV/7-AAD쌍표기법분석세포조망,병응용Western blot방법검측조망상관단백caspase-3.결과표명,AZD8330가현저억제NCI-H929급IM9적세포활력,차억제효응정일정적시간화제량의뢰성,IM9세포48 h적반수억제농도(IC50)위19.88±2.7 nmol/L,NCI-H929세포48 h적반수억제농도(IC50)위29.3±2.03 nmol/L.세포주기결과현시,량충골수류세포균발생G1기조체;AZD8330처리후cyclin D수평현저증고,단시cyclin E수평강저,촉사세포발생G1기조체.AnnexinV/7-AAD결과현시,수착AZD8330농도증가,세포조망수량야상응증다,병차활화적caspase-3단백수평증고.결론:MEK억제제AZD8330가유효억제골수류세포NCI-H929화IM9적증식,사세포주기조체우G1기,병촉진세포발생조망.