CAJ | 학술논문

本研究旨在探讨Notch1信号通路的配体delta-like ligand4(DLL4)基因过表达对K562细胞增殖的影响及其可能的作用机制.采用脂质体介导将含配体DLL4基因的质粒pBudCE4.1-DLL4转染K562细胞,通过RT-PCR和Western blot检测转染48 h后DLL4基因的mRNA及蛋白表达,同样检测转染后Notch1受体胞内区(NICD)、下游靶基因Hesl的mRNA及蛋白表达;通过Western blot检测与Notch信号通路相关的细胞转录因子YY1、原癌基因C-MYC及抑癌基因Rb蛋白的表达水平;用CCK-8法检测转染后细胞的增殖情况;用流式细胞术检测转染质粒48 h后各组细胞的凋亡情况.结果表明,DLL4基因转染后的K562细胞中DLL4、NICD及下游靶基因Hesl的mRNA及蛋白表达量比对照组明显增多(P＜0.05),说明DLL4的过表达激活了Notch1信号通路;Western blot方法检测显示,DLL4的转染增加了细胞转录因子YY1、原癌基因C-MYC及抑癌基因Rb蛋白的表达,从而抑制了K562细胞的生长,诱导细胞周期停滞于G1期及细胞凋亡的增加.结论:外源性DLL4基因过表达可有效活化K562细胞内Notch1信号通路,可能通过YY1、C-MYC及Rb等Notch信号通路相关基因的高表达诱导K562细胞的生长减慢及细胞凋亡.
본연구지재탐토Notch1신호통로적배체delta-like ligand4(DLL4)기인과표체대K562세포증식적영향급기가능적작용궤제.채용지질체개도장함배체DLL4기인적질립pBudCE4.1-DLL4전염K562세포,통과RT-PCR화Western blot검측전염48 h후DLL4기인적mRNA급단백표체,동양검측전염후Notch1수체포내구(NICD)、하유파기인Hesl적mRNA급단백표체;통과Western blot검측여Notch신호통로상관적세포전록인자YY1、원암기인C-MYC급억암기인Rb단백적표체수평;용CCK-8법검측전염후세포적증식정황;용류식세포술검측전염질립48 h후각조세포적조망정황.결과표명,DLL4기인전염후적K562세포중DLL4、NICD급하유파기인Hesl적mRNA급단백표체량비대조조명현증다(P＜0.05),설명DLL4적과표체격활료Notch1신호통로;Western blot방법검측현시,DLL4적전염증가료세포전록인자YY1、원암기인C-MYC급억암기인Rb단백적표체,종이억제료K562세포적생장,유도세포주기정체우G1기급세포조망적증가.결론:외원성DLL4기인과표체가유효활화K562세포내Notch1신호통로,가능통과YY1、C-MYC급Rb등Notch신호통로상관기인적고표체유도K562세포적생장감만급세포조망.