宁夏医科大学学报
寧夏醫科大學學報
저하의과대학학보
JOURNAL OF NINGXIA MEDICAL COLLEGE
2014年
9期
949-953
,共5页
黎明%张晓霞%赵嘉庆%杨延辉%赵巍%王浩
黎明%張曉霞%趙嘉慶%楊延輝%趙巍%王浩
려명%장효하%조가경%양연휘%조외%왕호
Eg95%昆虫表达%Sf9细胞
Eg95%昆蟲錶達%Sf9細胞
Eg95%곤충표체%Sf9세포
Eg95%insect expression%Sf9 cells
目的 采用真核昆虫表达系统表达细粒棘球蚴95(Eg95)抗原,探讨其免疫原性.方法 从GeneBank 获取Eg95基因序列(序列编号:EU595937.1),合成开放读码框(CDS)全长基因;利用杆状病毒表达系统Bac-to-Bac symtem在昆虫细胞中表达目的基因Eg95,亲和层析纯化,Western blot鉴定;对Balb/c小鼠分别免疫接种重组昆虫表达目的蛋白Eg95(简称eu rEg95)、原核重组表达Eg95(简称pro rEg95)、阴性对照PBS,制备免疫血清,间接法ELISA对各组特异性IgG抗体进行分析.结果 合成Eg95基因CDS全长471 bp,经测序与理论完全一致;Western blot证实目的蛋白通过重组杆状病毒在昆虫细胞内实现可溶性表达;ELISA结果表明:eu rEg95能够诱导产生原头蚴特异性IgG抗体,抗体水平高于pro rEg95组(P＜0.05).结论 利用昆虫杆状病毒表达系统成功表达出具有良好免疫原性的Eg95抗原,为优化细粒棘球蚴疫苗奠定基础.
目的 採用真覈昆蟲錶達繫統錶達細粒棘毬蚴95(Eg95)抗原,探討其免疫原性.方法 從GeneBank 穫取Eg95基因序列(序列編號:EU595937.1),閤成開放讀碼框(CDS)全長基因;利用桿狀病毒錶達繫統Bac-to-Bac symtem在昆蟲細胞中錶達目的基因Eg95,親和層析純化,Western blot鑒定;對Balb/c小鼠分彆免疫接種重組昆蟲錶達目的蛋白Eg95(簡稱eu rEg95)、原覈重組錶達Eg95(簡稱pro rEg95)、陰性對照PBS,製備免疫血清,間接法ELISA對各組特異性IgG抗體進行分析.結果 閤成Eg95基因CDS全長471 bp,經測序與理論完全一緻;Western blot證實目的蛋白通過重組桿狀病毒在昆蟲細胞內實現可溶性錶達;ELISA結果錶明:eu rEg95能夠誘導產生原頭蚴特異性IgG抗體,抗體水平高于pro rEg95組(P＜0.05).結論 利用昆蟲桿狀病毒錶達繫統成功錶達齣具有良好免疫原性的Eg95抗原,為優化細粒棘毬蚴疫苗奠定基礎.
목적 채용진핵곤충표체계통표체세립극구유95(Eg95)항원,탐토기면역원성.방법 종GeneBank 획취Eg95기인서렬(서렬편호:EU595937.1),합성개방독마광(CDS)전장기인;이용간상병독표체계통Bac-to-Bac symtem재곤충세포중표체목적기인Eg95,친화층석순화,Western blot감정;대Balb/c소서분별면역접충중조곤충표체목적단백Eg95(간칭eu rEg95)、원핵중조표체Eg95(간칭pro rEg95)、음성대조PBS,제비면역혈청,간접법ELISA대각조특이성IgG항체진행분석.결과 합성Eg95기인CDS전장471 bp,경측서여이론완전일치;Western blot증실목적단백통과중조간상병독재곤충세포내실현가용성표체;ELISA결과표명:eu rEg95능구유도산생원두유특이성IgG항체,항체수평고우pro rEg95조(P＜0.05).결론 이용곤충간상병독표체계통성공표체출구유량호면역원성적Eg95항원,위우화세립극구유역묘전정기출.
