生态毒理学报
生態毒理學報
생태독이학보
ASIAN JOURNAL OF ECOTOXICOLOGY
2014年
3期
503-511
,共9页
杜俊俏%廖承红%周海龙%刁晓平%陈好%李玉虎%王富强
杜俊俏%廖承紅%週海龍%刁曉平%陳好%李玉虎%王富彊
두준초%료승홍%주해룡%조효평%진호%리옥호%왕부강
hsp90基因%马氏珠母贝%实时荧光定量PCR%肝胰腺
hsp90基因%馬氏珠母貝%實時熒光定量PCR%肝胰腺
hsp90기인%마씨주모패%실시형광정량PCR%간이선
hsp90 gene%Pinctada martensii%quantitative real-time RT-PCR%hepatopancreas
利用简并引物PCR(polymerase chain reaction,PCR)方法和eDNA末端快速扩增(rapid amplification of cDNA ends,RACE)技术获得马氏珠母贝Pinctada martensii hsp90基因cDNA序列,全长为2 584 bp.根据所得序列设计定量特异性PCR引物,采用半定量RT-PCR以及实时荧光定量(real-time PCR)PCR检测了马氏珠母贝外套膜、鳃、肝胰腺、闭壳肌、性腺、腹足等组织中hsp90基因的表达水平.同时,利用荧光定量PCR技术检测了芘暴露处理前后马氏珠母贝肝胰腺组织中hsp90基因的表达水平.研究结果表明:马氏珠母贝hsp90基因在不同组织中的表达水平为性腺＞鳃＞肝胰腺＞外套膜＞腹足＞闭壳肌,表现出组织差异性.芘胁迫对马氏珠母贝hsp90基因的表达有一定的诱导作用,暴露后第1天和第5天,随染毒浓度的增加,hsp90基因的表达上调,呈现出一定的剂量-效应关系,于染毒后第7天基本恢复.研究结果显示,马氏珠母贝hsp90基因可以作为一种理想的分子生物标记物用于监测海洋环境中芘的污染.
利用簡併引物PCR(polymerase chain reaction,PCR)方法和eDNA末耑快速擴增(rapid amplification of cDNA ends,RACE)技術穫得馬氏珠母貝Pinctada martensii hsp90基因cDNA序列,全長為2 584 bp.根據所得序列設計定量特異性PCR引物,採用半定量RT-PCR以及實時熒光定量(real-time PCR)PCR檢測瞭馬氏珠母貝外套膜、鰓、肝胰腺、閉殼肌、性腺、腹足等組織中hsp90基因的錶達水平.同時,利用熒光定量PCR技術檢測瞭芘暴露處理前後馬氏珠母貝肝胰腺組織中hsp90基因的錶達水平.研究結果錶明:馬氏珠母貝hsp90基因在不同組織中的錶達水平為性腺＞鰓＞肝胰腺＞外套膜＞腹足＞閉殼肌,錶現齣組織差異性.芘脅迫對馬氏珠母貝hsp90基因的錶達有一定的誘導作用,暴露後第1天和第5天,隨染毒濃度的增加,hsp90基因的錶達上調,呈現齣一定的劑量-效應關繫,于染毒後第7天基本恢複.研究結果顯示,馬氏珠母貝hsp90基因可以作為一種理想的分子生物標記物用于鑑測海洋環境中芘的汙染.
이용간병인물PCR(polymerase chain reaction,PCR)방법화eDNA말단쾌속확증(rapid amplification of cDNA ends,RACE)기술획득마씨주모패Pinctada martensii hsp90기인cDNA서렬,전장위2 584 bp.근거소득서렬설계정량특이성PCR인물,채용반정량RT-PCR이급실시형광정량(real-time PCR)PCR검측료마씨주모패외투막、새、간이선、폐각기、성선、복족등조직중hsp90기인적표체수평.동시,이용형광정량PCR기술검측료비폭로처리전후마씨주모패간이선조직중hsp90기인적표체수평.연구결과표명:마씨주모패hsp90기인재불동조직중적표체수평위성선＞새＞간이선＞외투막＞복족＞폐각기,표현출조직차이성.비협박대마씨주모패hsp90기인적표체유일정적유도작용,폭로후제1천화제5천,수염독농도적증가,hsp90기인적표체상조,정현출일정적제량-효응관계,우염독후제7천기본회복.연구결과현시,마씨주모패hsp90기인가이작위일충이상적분자생물표기물용우감측해양배경중비적오염.
