热带生物学报
熱帶生物學報
열대생물학보
JOURNAL OF SOUTH CHINA UNIVERSITY OF TROPICAL AGRICULTURE
2014年
3期
233-238
,共6页
橡胶树胶胞炭疽病菌%CgE6%RNAi突变体%分子鉴定
橡膠樹膠胞炭疽病菌%CgE6%RNAi突變體%分子鑒定
상효수효포탄저병균%CgE6%RNAi돌변체%분자감정
Colletotrichum gloeosporioides%CgE6%RNAi mutant%molecular identification
为了研究橡胶树胶孢炭疽病菌效应蛋白基因CgE6的功能,笔者利用RNAi技术原理,构建了可用于转化丝状真菌的RNAi双元重组载体pSilent-CgE6-FR,通过PEG介导法遗传转化橡胶树胶孢炭疽病菌原生质体,在抗性培养基上获得了CgE6的RNAi转化子并任意选取抗性转化子进行分子鉴定.结果表明,所检测的转化子基因组中都有抗性标记的整合;与野生型菌株相比,所检测的转化子中目标基因CgE6的表达均出现不同程度的降低,其中1,2,7号转化子的表达水平最低;本实验成功构建了有效的CgE6效应蛋白基因的RNAi突变体,为进一步研究该效应蛋白的功能奠定了基础.
為瞭研究橡膠樹膠孢炭疽病菌效應蛋白基因CgE6的功能,筆者利用RNAi技術原理,構建瞭可用于轉化絲狀真菌的RNAi雙元重組載體pSilent-CgE6-FR,通過PEG介導法遺傳轉化橡膠樹膠孢炭疽病菌原生質體,在抗性培養基上穫得瞭CgE6的RNAi轉化子併任意選取抗性轉化子進行分子鑒定.結果錶明,所檢測的轉化子基因組中都有抗性標記的整閤;與野生型菌株相比,所檢測的轉化子中目標基因CgE6的錶達均齣現不同程度的降低,其中1,2,7號轉化子的錶達水平最低;本實驗成功構建瞭有效的CgE6效應蛋白基因的RNAi突變體,為進一步研究該效應蛋白的功能奠定瞭基礎.
위료연구상효수효포탄저병균효응단백기인CgE6적공능,필자이용RNAi기술원리,구건료가용우전화사상진균적RNAi쌍원중조재체pSilent-CgE6-FR,통과PEG개도법유전전화상효수효포탄저병균원생질체,재항성배양기상획득료CgE6적RNAi전화자병임의선취항성전화자진행분자감정.결과표명,소검측적전화자기인조중도유항성표기적정합;여야생형균주상비,소검측적전화자중목표기인CgE6적표체균출현불동정도적강저,기중1,2,7호전화자적표체수평최저;본실험성공구건료유효적CgE6효응단백기인적RNAi돌변체,위진일보연구해효응단백적공능전정료기출.
