中国骨伤
中國骨傷
중국골상
CHINA JOURNAL OF ORTHOPAEDICS AND TRAUMATOLOGY
2014年
10期
843-847
,共5页
路玉峰%俞庆声%郭万首%程立明%张韫
路玉峰%俞慶聲%郭萬首%程立明%張韞
로옥봉%유경성%곽만수%정립명%장운
股骨头%微血管%内皮细胞%细胞培养技术%细胞分离
股骨頭%微血管%內皮細胞%細胞培養技術%細胞分離
고골두%미혈관%내피세포%세포배양기술%세포분리
Femur head%Microvessels%Endothelial cells%Cell culture techniques%Cell separation
目的:探讨培养人股骨头骨微血管内皮细胞分离培养方法.方法:2013年10月至2014年1月15例行髋关节置换患者切除的内部无病变的股骨头,男2例,女13例;年龄38～92岁,平均71.2岁.无菌条件下将股骨头内松质骨咬成碎骨粒,放入培养基.采用酶消化法,密度梯度离心法分离细胞;差速贴壁法,选择性培养基法纯化细胞.倒置显微镜观察细胞特点,并采用vWF、CD31免疫荧光进行细胞鉴定.结果:原代培养24 h后倒置显微镜下观察细胞数量与患者年龄呈正相关,年龄越大细胞越少.培养4～5 d细胞呈短梭形、多角形或“鹩卵石”状.培养7～10d细胞生长密集,细胞融合呈漩涡状,接触抑制明显.vWF、CD31免疫荧光检测阳性率100％,表明细胞为骨微血管内皮细胞.结论:人股骨头骨微血管内皮细胞分离培养方法简单、稳定、有效、可重复性好,可以获得纯度较高的股骨头骨微血管内皮细胞.
目的:探討培養人股骨頭骨微血管內皮細胞分離培養方法.方法:2013年10月至2014年1月15例行髖關節置換患者切除的內部無病變的股骨頭,男2例,女13例;年齡38～92歲,平均71.2歲.無菌條件下將股骨頭內鬆質骨咬成碎骨粒,放入培養基.採用酶消化法,密度梯度離心法分離細胞;差速貼壁法,選擇性培養基法純化細胞.倒置顯微鏡觀察細胞特點,併採用vWF、CD31免疫熒光進行細胞鑒定.結果:原代培養24 h後倒置顯微鏡下觀察細胞數量與患者年齡呈正相關,年齡越大細胞越少.培養4～5 d細胞呈短梭形、多角形或“鷯卵石”狀.培養7～10d細胞生長密集,細胞融閤呈漩渦狀,接觸抑製明顯.vWF、CD31免疫熒光檢測暘性率100％,錶明細胞為骨微血管內皮細胞.結論:人股骨頭骨微血管內皮細胞分離培養方法簡單、穩定、有效、可重複性好,可以穫得純度較高的股骨頭骨微血管內皮細胞.
목적:탐토배양인고골두골미혈관내피세포분리배양방법.방법:2013년10월지2014년1월15례행관관절치환환자절제적내부무병변적고골두,남2례,녀13례;년령38～92세,평균71.2세.무균조건하장고골두내송질골교성쇄골립,방입배양기.채용매소화법,밀도제도리심법분리세포;차속첩벽법,선택성배양기법순화세포.도치현미경관찰세포특점,병채용vWF、CD31면역형광진행세포감정.결과:원대배양24 h후도치현미경하관찰세포수량여환자년령정정상관,년령월대세포월소.배양4～5 d세포정단사형、다각형혹“료란석”상.배양7～10d세포생장밀집,세포융합정선와상,접촉억제명현.vWF、CD31면역형광검측양성솔100％,표명세포위골미혈관내피세포.결론:인고골두골미혈관내피세포분리배양방법간단、은정、유효、가중복성호,가이획득순도교고적고골두골미혈관내피세포.
