中国预防兽医学报
中國預防獸醫學報
중국예방수의학보
CHINESE JOURNAL OF PREVENTIVE VETERINARY MEDICINE
2014年
11期
894-897
,共4页
刘文青%胡明丽%孙红岩%赵宝华
劉文青%鬍明麗%孫紅巖%趙寶華
류문청%호명려%손홍암%조보화
绵羊肺炎支原体%P30%HSP70C%克隆%表达%免疫原性
綿羊肺炎支原體%P30%HSP70C%剋隆%錶達%免疫原性
면양폐염지원체%P30%HSP70C%극륭%표체%면역원성
Mycopiasma ovipneumoniae%P30%HSP70C%cloning%expression%immunogenicity
为增强绵羊肺炎支原体标准株Y98的外膜抗原P30的免疫原性,本研究构建p30-hsp70C融合基因的原核重组表达载体,并转化大肠杆菌Rosetta,经IPTG诱导表达.SDS-PAGE和western blot结果表明,P30-HSP70C融合蛋白约40％以可溶性形式表达.将rP30和rP30-HSP70C以100 μg/只剂量分别免疫小鼠,免疫两次.间接ELISA试验表明,免疫的小鼠血清中两种蛋白的抗体效价分别为1:8 000和1:128 000.此外,两种蛋白免疫的小鼠血清中均检测出特异性的P30抗体.小鼠免疫保护试验结果显示,rP30和rP30-HSP70C的免疫保护率分别为50％和80％.这些结果表明P30和HSP70C的融合表达可以显著增强P30蛋白的免疫保护效果.
為增彊綿羊肺炎支原體標準株Y98的外膜抗原P30的免疫原性,本研究構建p30-hsp70C融閤基因的原覈重組錶達載體,併轉化大腸桿菌Rosetta,經IPTG誘導錶達.SDS-PAGE和western blot結果錶明,P30-HSP70C融閤蛋白約40％以可溶性形式錶達.將rP30和rP30-HSP70C以100 μg/隻劑量分彆免疫小鼠,免疫兩次.間接ELISA試驗錶明,免疫的小鼠血清中兩種蛋白的抗體效價分彆為1:8 000和1:128 000.此外,兩種蛋白免疫的小鼠血清中均檢測齣特異性的P30抗體.小鼠免疫保護試驗結果顯示,rP30和rP30-HSP70C的免疫保護率分彆為50％和80％.這些結果錶明P30和HSP70C的融閤錶達可以顯著增彊P30蛋白的免疫保護效果.
위증강면양폐염지원체표준주Y98적외막항원P30적면역원성,본연구구건p30-hsp70C융합기인적원핵중조표체재체,병전화대장간균Rosetta,경IPTG유도표체.SDS-PAGE화western blot결과표명,P30-HSP70C융합단백약40％이가용성형식표체.장rP30화rP30-HSP70C이100 μg/지제량분별면역소서,면역량차.간접ELISA시험표명,면역적소서혈청중량충단백적항체효개분별위1:8 000화1:128 000.차외,량충단백면역적소서혈청중균검측출특이성적P30항체.소서면역보호시험결과현시,rP30화rP30-HSP70C적면역보호솔분별위50％화80％.저사결과표명P30화HSP70C적융합표체가이현저증강P30단백적면역보호효과.
