CAJ | 학술논문

目的：构建真核表达载体pBI－EGFP－Bach1，并检测其表达及对血红素氧化物（HO－1）表达的影响。方法将Bach1基因与质粒pBI－EGFP连接构成重组质粒，RT－PCR法检测重组载体及HO－1在SMMC7721细胞中的表达情况，MTT检测细胞活性。结果 NheⅠ和 MluⅠ双酶切以及PCR表明重组质粒pBI－EGFP－Bach1构建成功；RT－PCR显示转染重组Bach1 mRNA表达显著升高，同时 HO－1的表达降低；MTT检测未转染组的IC50为0．15μg／ml，转染组的IC50为0．21μg／ml。结论构建了真核表达载体pBI－EGFP－Bach1，转染后Bach1能够在SMMC－7721细胞中表达并抑制了HO－1；MTT验证重组质粒能提高癌细胞对长春新碱（ VCR）敏感性。
목적：구건진핵표체재체pBI－EGFP－Bach1，병검측기표체급대혈홍소양화물（HO－1）표체적영향。방법장Bach1기인여질립pBI－EGFP련접구성중조질립，RT－PCR법검측중조재체급HO－1재SMMC7721세포중적표체정황，MTT검측세포활성。결과 NheⅠ화 MluⅠ쌍매절이급PCR표명중조질립pBI－EGFP－Bach1구건성공；RT－PCR현시전염중조Bach1 mRNA표체현저승고，동시 HO－1적표체강저；MTT검측미전염조적IC50위0．15μg／ml，전염조적IC50위0．21μg／ml。결론구건료진핵표체재체pBI－EGFP－Bach1，전염후Bach1능구재SMMC－7721세포중표체병억제료HO－1；MTT험증중조질립능제고암세포대장춘신감（ VCR）민감성。