华中科技大学学报（医学版）
華中科技大學學報（醫學版）
화중과기대학학보（의학판）
ACTA UNIVERSITATIS MEDICINAE TONGJI
2014年
5期
541-545
,共5页
游浩%张觅%刘洋%李明辉%陈方舟%郑先念
遊浩%張覓%劉洋%李明輝%陳方舟%鄭先唸
유호%장멱%류양%리명휘%진방주%정선념
Notch信号通路%骨肉瘤%MG-63细胞系%增殖抑制
Notch信號通路%骨肉瘤%MG-63細胞繫%增殖抑製
Notch신호통로%골육류%MG-63세포계%증식억제
Notch signaling pathway%osteosarcoma%MG-63 cells%proliferation inhibition
目的 探讨γ-分泌酶抑制剂DAPT阻断Notch信号通路对骨肉瘤MG-63细胞系增殖和凋亡的影响及其机制.方法 体外培养骨肉瘤MG-63细胞株;MTT法检测不同浓度DAPT(1.0、5.0、10.0 μmol/L)对骨肉瘤MG-63细胞增殖的抑制作用;透射电镜下观察不同浓度DAPT对骨肉瘤MG-63细胞形态的影响;流式细胞术结合AnnexinV-FITC/PI双染分析不同浓度DAPT对骨肉瘤MG-63细胞凋亡的影响;RT-PCR法检测骨肉瘤MG-63细胞Notch1、HES1基因表达.结果 不同浓度的DAPT作用于骨肉瘤MG-63细胞后,细胞增殖水平明显下降(P＜0.05),1.0μmol/L DAPT即抑制细胞生长,随着DAPT浓度增加抑制效果明显增强,呈显著的浓度依赖关系,且随着DAPT作用时间延长,抑制效果也明显增强.细胞凋亡结果分析表明,DAPT能浓度依赖性地诱导骨肉瘤MG-63细胞发生凋亡.RT-PCR显示随着DAPT量的增加,Notch 1、HES 1 mRNA的表达逐渐下降(均P＜0.05).结论 DAPT对骨肉瘤MG-63细胞抑制增殖和诱导凋亡的作用可能与下调MG-63细胞中Notch 1、HES 1 mRNA的表达有关.
目的 探討γ-分泌酶抑製劑DAPT阻斷Notch信號通路對骨肉瘤MG-63細胞繫增殖和凋亡的影響及其機製.方法 體外培養骨肉瘤MG-63細胞株;MTT法檢測不同濃度DAPT(1.0、5.0、10.0 μmol/L)對骨肉瘤MG-63細胞增殖的抑製作用;透射電鏡下觀察不同濃度DAPT對骨肉瘤MG-63細胞形態的影響;流式細胞術結閤AnnexinV-FITC/PI雙染分析不同濃度DAPT對骨肉瘤MG-63細胞凋亡的影響;RT-PCR法檢測骨肉瘤MG-63細胞Notch1、HES1基因錶達.結果 不同濃度的DAPT作用于骨肉瘤MG-63細胞後,細胞增殖水平明顯下降(P＜0.05),1.0μmol/L DAPT即抑製細胞生長,隨著DAPT濃度增加抑製效果明顯增彊,呈顯著的濃度依賴關繫,且隨著DAPT作用時間延長,抑製效果也明顯增彊.細胞凋亡結果分析錶明,DAPT能濃度依賴性地誘導骨肉瘤MG-63細胞髮生凋亡.RT-PCR顯示隨著DAPT量的增加,Notch 1、HES 1 mRNA的錶達逐漸下降(均P＜0.05).結論 DAPT對骨肉瘤MG-63細胞抑製增殖和誘導凋亡的作用可能與下調MG-63細胞中Notch 1、HES 1 mRNA的錶達有關.
목적 탐토γ-분비매억제제DAPT조단Notch신호통로대골육류MG-63세포계증식화조망적영향급기궤제.방법 체외배양골육류MG-63세포주;MTT법검측불동농도DAPT(1.0、5.0、10.0 μmol/L)대골육류MG-63세포증식적억제작용;투사전경하관찰불동농도DAPT대골육류MG-63세포형태적영향;류식세포술결합AnnexinV-FITC/PI쌍염분석불동농도DAPT대골육류MG-63세포조망적영향;RT-PCR법검측골육류MG-63세포Notch1、HES1기인표체.결과 불동농도적DAPT작용우골육류MG-63세포후,세포증식수평명현하강(P＜0.05),1.0μmol/L DAPT즉억제세포생장,수착DAPT농도증가억제효과명현증강,정현저적농도의뢰관계,차수착DAPT작용시간연장,억제효과야명현증강.세포조망결과분석표명,DAPT능농도의뢰성지유도골육류MG-63세포발생조망.RT-PCR현시수착DAPT량적증가,Notch 1、HES 1 mRNA적표체축점하강(균P＜0.05).결론 DAPT대골육류MG-63세포억제증식화유도조망적작용가능여하조MG-63세포중Notch 1、HES 1 mRNA적표체유관.
