食品科学
食品科學
식품과학
FOOD SCIENCE
2014年
21期
143-148
,共6页
刘英丽%刘骏明%王静%孙宝国%THIERRY Tron
劉英麗%劉駿明%王靜%孫寶國%THIERRY Tron
류영려%류준명%왕정%손보국%THIERRY Tron
漆酶%异源表达%组氨酸标签%碳端%氮端
漆酶%異源錶達%組氨痠標籤%碳耑%氮耑
칠매%이원표체%조안산표첨%탄단%담단
laccase%heterologous expression%his-tag%C terminus%N terminus
以来源Trametes sp.C30的LAC3漆酶基因为研究对象,通过引物设计进行突变,在其C端和N端进行延长,分别引入6个组氨酸标签,并异源表达于酿酒酵母Saccharomyces cerevisiae中,将获得的重组酶进行比较发现漆酶末端氨基酸序列的改变对酶学性质的影响较大.C端引入组氨酸标签的重组酶的表达量不受影响,但是在N末端引入组氨酸标签的重组酶表达量只有LAC3的一半.添加组氨酸标签的融合蛋白对ABTS和SGZ两种底物的亲和力得到增强.而在酸碱稳定性耐受方面,与LAC3相比,N末端氨基酸的改变使其在酸碱稳定性方面得到了增强,中碱性条件下仍能保持较佳活性.C端和N端可塑性的研究对于漆酶新性状的获得具有重要意义.
以來源Trametes sp.C30的LAC3漆酶基因為研究對象,通過引物設計進行突變,在其C耑和N耑進行延長,分彆引入6箇組氨痠標籤,併異源錶達于釀酒酵母Saccharomyces cerevisiae中,將穫得的重組酶進行比較髮現漆酶末耑氨基痠序列的改變對酶學性質的影響較大.C耑引入組氨痠標籤的重組酶的錶達量不受影響,但是在N末耑引入組氨痠標籤的重組酶錶達量隻有LAC3的一半.添加組氨痠標籤的融閤蛋白對ABTS和SGZ兩種底物的親和力得到增彊.而在痠堿穩定性耐受方麵,與LAC3相比,N末耑氨基痠的改變使其在痠堿穩定性方麵得到瞭增彊,中堿性條件下仍能保持較佳活性.C耑和N耑可塑性的研究對于漆酶新性狀的穫得具有重要意義.
이래원Trametes sp.C30적LAC3칠매기인위연구대상,통과인물설계진행돌변,재기C단화N단진행연장,분별인입6개조안산표첨,병이원표체우양주효모Saccharomyces cerevisiae중,장획득적중조매진행비교발현칠매말단안기산서렬적개변대매학성질적영향교대.C단인입조안산표첨적중조매적표체량불수영향,단시재N말단인입조안산표첨적중조매표체량지유LAC3적일반.첨가조안산표첨적융합단백대ABTS화SGZ량충저물적친화력득도증강.이재산감은정성내수방면,여LAC3상비,N말단안기산적개변사기재산감은정성방면득도료증강,중감성조건하잉능보지교가활성.C단화N단가소성적연구대우칠매신성상적획득구유중요의의.
