CAJ | 학술논문

目的构建人线粒体融合蛋白-2(mitofusin-2, MFN2)基因真核表达载体并对其进行鉴定。方法在pEGFP-N1载体多克隆位点插入人MFN2基因编码区序列,酶切、测序验证是否插入及正确性。将所构建载体转染原代培养的人血管平滑肌细胞(Vascular smooth muscle cel s,VSMCs),荧光显微镜观察绿色荧光蛋白表达；荧光定量PCR和Western blot分别检测MFN2的mRNA及蛋白表达。结果成功构建了人MFN2基因真核表达载体,其转染VSMCs后,可以检测到MFN2 mRNA及蛋白水平高表达(<0.01)。结论成功构建了人MFN2基因真核表达载体,且能够在原代VSMC中过表达。
목적구건인선립체융합단백-2(mitofusin-2, MFN2)기인진핵표체재체병대기진행감정。방법재pEGFP-N1재체다극륭위점삽입인MFN2기인편마구서렬,매절、측서험증시부삽입급정학성。장소구건재체전염원대배양적인혈관평활기세포(Vascular smooth muscle cel s,VSMCs),형광현미경관찰록색형광단백표체；형광정량PCR화Western blot분별검측MFN2적mRNA급단백표체。결과성공구건료인MFN2기인진핵표체재체,기전염VSMCs후,가이검측도MFN2 mRNA급단백수평고표체(<0.01)。결론성공구건료인MFN2기인진핵표체재체,차능구재원대VSMC중과표체。