中华生物医学工程杂志
中華生物醫學工程雜誌
중화생물의학공정잡지
CHINESE JOURNAL OF BIOMEDICAL ENGINEERING
2013年
4期
261-265
,共5页
刘城%吴平生%王月刚%裴静娴%赖艳娴
劉城%吳平生%王月剛%裴靜嫻%賴豔嫻
류성%오평생%왕월강%배정한%뢰염한
微血管%内皮细胞%新生血管化,生理性
微血管%內皮細胞%新生血管化,生理性
미혈관%내피세포%신생혈관화,생이성
Microvessels%Endothelial cells%Neovascularization,physiologic
目的 研究野生型低氧诱导因子1α(HIF-1α)对人微血管内皮细胞(HMVEC-L)增殖、迁移、成管的影响,并初步探讨其作用机制.方法 实验分正常对照组、物理低氧组及野生型HIF-1α基因组,分别用MTS法、划痕法、成管法检测前述3组HMVEC-L增殖、迁移、成管的能力,并用Western印迹测定HIF-1α及血管内皮生长因子(VEGF)蛋白表达水平.结果 MTS法结果显示,野生型HIF-1α基因转染HMVEC-L后明显促进HMVEC-L增殖,与正常对照组、物理低氧组差异有统计学意义(P＜0.05).划痕结果显示,正常对照组、物理低氧组、野生型HIF-1α因组HMVEC-L迁移率分别为(1.09±0.25)％、(8.65±1.03)％及(17.12±1.97)％,其中野生型HIF-1α基因组迁移率最大(P＜0.05).成管法结果显示,正常对照组、物理低氧组、野生型HIF-1α因组成管长度分别为(0.34±0.07)、(0.90±0.16)、(1.76±0.09) mm/视野,其中野生型HIF-1α基因组成管长度最长(P＜0.05).Western印迹结果显示,与正常对照组相比,物理低氧组、野生型HIF-1α基因组HIF-1α、VEGF蛋白表达均明显升高(P＜0.05),其中野生型HIF-1α基因组HIF-1α、VEGF蛋白表达水平最高(均为P＜0.05).结论 野生型HIF-1α基因能在体外促进HMVEC-L增殖、迁移、管样形成,是一种具有临床应用前景的血管新生基因.
目的 研究野生型低氧誘導因子1α(HIF-1α)對人微血管內皮細胞(HMVEC-L)增殖、遷移、成管的影響,併初步探討其作用機製.方法 實驗分正常對照組、物理低氧組及野生型HIF-1α基因組,分彆用MTS法、劃痕法、成管法檢測前述3組HMVEC-L增殖、遷移、成管的能力,併用Western印跡測定HIF-1α及血管內皮生長因子(VEGF)蛋白錶達水平.結果 MTS法結果顯示,野生型HIF-1α基因轉染HMVEC-L後明顯促進HMVEC-L增殖,與正常對照組、物理低氧組差異有統計學意義(P＜0.05).劃痕結果顯示,正常對照組、物理低氧組、野生型HIF-1α因組HMVEC-L遷移率分彆為(1.09±0.25)％、(8.65±1.03)％及(17.12±1.97)％,其中野生型HIF-1α基因組遷移率最大(P＜0.05).成管法結果顯示,正常對照組、物理低氧組、野生型HIF-1α因組成管長度分彆為(0.34±0.07)、(0.90±0.16)、(1.76±0.09) mm/視野,其中野生型HIF-1α基因組成管長度最長(P＜0.05).Western印跡結果顯示,與正常對照組相比,物理低氧組、野生型HIF-1α基因組HIF-1α、VEGF蛋白錶達均明顯升高(P＜0.05),其中野生型HIF-1α基因組HIF-1α、VEGF蛋白錶達水平最高(均為P＜0.05).結論 野生型HIF-1α基因能在體外促進HMVEC-L增殖、遷移、管樣形成,是一種具有臨床應用前景的血管新生基因.
목적 연구야생형저양유도인자1α(HIF-1α)대인미혈관내피세포(HMVEC-L)증식、천이、성관적영향,병초보탐토기작용궤제.방법 실험분정상대조조、물리저양조급야생형HIF-1α기인조,분별용MTS법、화흔법、성관법검측전술3조HMVEC-L증식、천이、성관적능력,병용Western인적측정HIF-1α급혈관내피생장인자(VEGF)단백표체수평.결과 MTS법결과현시,야생형HIF-1α기인전염HMVEC-L후명현촉진HMVEC-L증식,여정상대조조、물리저양조차이유통계학의의(P＜0.05).화흔결과현시,정상대조조、물리저양조、야생형HIF-1α인조HMVEC-L천이솔분별위(1.09±0.25)％、(8.65±1.03)％급(17.12±1.97)％,기중야생형HIF-1α기인조천이솔최대(P＜0.05).성관법결과현시,정상대조조、물리저양조、야생형HIF-1α인조성관장도분별위(0.34±0.07)、(0.90±0.16)、(1.76±0.09) mm/시야,기중야생형HIF-1α기인조성관장도최장(P＜0.05).Western인적결과현시,여정상대조조상비,물리저양조、야생형HIF-1α기인조HIF-1α、VEGF단백표체균명현승고(P＜0.05),기중야생형HIF-1α기인조HIF-1α、VEGF단백표체수평최고(균위P＜0.05).결론 야생형HIF-1α기인능재체외촉진HMVEC-L증식、천이、관양형성,시일충구유림상응용전경적혈관신생기인.
Objective To study the effects of wild-type hypoxia-inducible factor-1α (HIF-1α) on proliferation,migration and tube formation in vitro in human lung microvascular endothelial cells (HMVEC-Ls).Methods The HMVEC-Ls were divided into normal control group,physical hypoxia group and HIF-1α transfection group.The MTS,wound-healing migration,and Matrigel assays were employed to determine the proliferation,migration and tube formation,respectively.The protein expressions of HIF-1α and VEGF were analyzed by Western blotting.Results Compared with normal control and physical hypoxia groups,transfection of HMVEC-L with wild-type HIF-1αt at day 3 resulted in pronounced HMVEC-L proliferation (P＜0.05),a significantly augmented migration rate of the genome [(1.09±0.25)％ and (8.65±1.03)％ vs (17.12±1.97)％,P＜0.05] and substantially increased length of tube [(0.34±0.07) and (0.90±0.16) vs (1.76±0.09) mm/field,P＜0.05].Western blotting assay evidenced significantly augmented HIF-1αt and VEGF expressions in physical hypoxia and wild-type HIF-1α groups (all P＜0.05),particularly the latter.Conclusion Wild-type HIF-1α promotes angiogenesis by facilitating HMVEC-L proliferation,migration and tube formation in vitro and is expected to be a promising target for therapeutic angiogenesis.
