中华劳动卫生职业病杂志
中華勞動衛生職業病雜誌
중화노동위생직업병잡지
CHINESE JOURNAL OF INDUSTRIAL HYGIENE AND OCCUPATIONAL DISEASES
2012年
11期
816-819
,共4页
三甲基氯化锡%NF-κB%谷胱甘肽%活性氧组分
三甲基氯化錫%NF-κB%穀胱甘肽%活性氧組分
삼갑기록화석%NF-κB%곡광감태%활성양조분
Trimethyltin chloride%NF-kapa B%Glutathion%Reactive oxygen species
目的 在体外条件下,研究三甲基氯化锡(trimethyltin chloride,TMT)对PC12细胞增殖、细胞凋亡及细胞氧化损伤的作用,并探讨TMT对NF-kB表达的影响.方法 (1)不同浓度TMT(0、0.3125、0.6250、1.2500、2.500、5.000、10.000、20.000 μmol/L)处理PC12细胞24、48 h,噻唑蓝(MTT)法测定细胞存活率；(2)1.25、2.50、5.00、10.00 μmol/L TMT分别染毒PC12细胞12、24h后,流式细胞仪检测检测细胞凋亡率；(3)1.25、2.50、5.00、10.00 μmol/L剂量的TMT染毒PC12细胞6h后,测定活性氯(ROS)和谷胱甘肽(GSH)含量的变化；(4)1.25、2.50、5.00、10.00 μmol/L剂量的TMT染毒PC12细胞12h后免疫印迹法(Western blot)检测核蛋白NF-kB的水平.结果 与溶剂对照组比较,染毒24 h,2.5000、5.0000、10.0000、20.0000 μmol/L TMT剂量组细胞存活率明显下降；染毒48 h,1.2500、2.5000、5.0000、10.0000、20.0000 μmol/L剂量组细胞存活率明显下降,差异均有统计学意义(P＜0.05).1.25、2.50、5.00、10.00 μmol/L TMT染毒细胞12h,凋亡率分别为15.30％±0.75％、18.90％±0.61％、22.00％±0.60％、36.50％±0.66％,染毒24 h凋亡率分别为28.60％±0.40％、43.54％±2.00％、65.73％±0.71％、74.67％±0.40％,明显高于对照组[12 h:(12.80％±1.00％)、24 h:(16.83％±0.25％)],差异均有统计学意义(P＜0.05).1.25、2.50、5.00、10.00 μmol/L剂量组的ROS荧光强度值分别为对照组的1.42、1.71、1.78、1.89倍,差异有统计学意义(P＜0.05).2.50、5.00、10.00 μmol/L组GSH含量分别为(0.17±0.0)、(0.20±0.04)、(0.07±0.03)μmol/μg pro,明显低于对照组(0.30±0.01) μmol/L pro,差异有统计学意义(P＜0.05).2.50、5.00、10.00 μmol/L剂量组NF-kB p65表达的蛋白条带灰度值明显高于对照组,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 在本实验条件下,TMT对PC12细胞具有明显抑制增殖和诱导凋亡的作用,其作用可能与氧化应激以及NF-kB信号通路的激活有关.
目的 在體外條件下,研究三甲基氯化錫(trimethyltin chloride,TMT)對PC12細胞增殖、細胞凋亡及細胞氧化損傷的作用,併探討TMT對NF-kB錶達的影響.方法 (1)不同濃度TMT(0、0.3125、0.6250、1.2500、2.500、5.000、10.000、20.000 μmol/L)處理PC12細胞24、48 h,噻唑藍(MTT)法測定細胞存活率；(2)1.25、2.50、5.00、10.00 μmol/L TMT分彆染毒PC12細胞12、24h後,流式細胞儀檢測檢測細胞凋亡率；(3)1.25、2.50、5.00、10.00 μmol/L劑量的TMT染毒PC12細胞6h後,測定活性氯(ROS)和穀胱甘肽(GSH)含量的變化；(4)1.25、2.50、5.00、10.00 μmol/L劑量的TMT染毒PC12細胞12h後免疫印跡法(Western blot)檢測覈蛋白NF-kB的水平.結果 與溶劑對照組比較,染毒24 h,2.5000、5.0000、10.0000、20.0000 μmol/L TMT劑量組細胞存活率明顯下降；染毒48 h,1.2500、2.5000、5.0000、10.0000、20.0000 μmol/L劑量組細胞存活率明顯下降,差異均有統計學意義(P＜0.05).1.25、2.50、5.00、10.00 μmol/L TMT染毒細胞12h,凋亡率分彆為15.30％±0.75％、18.90％±0.61％、22.00％±0.60％、36.50％±0.66％,染毒24 h凋亡率分彆為28.60％±0.40％、43.54％±2.00％、65.73％±0.71％、74.67％±0.40％,明顯高于對照組[12 h:(12.80％±1.00％)、24 h:(16.83％±0.25％)],差異均有統計學意義(P＜0.05).1.25、2.50、5.00、10.00 μmol/L劑量組的ROS熒光彊度值分彆為對照組的1.42、1.71、1.78、1.89倍,差異有統計學意義(P＜0.05).2.50、5.00、10.00 μmol/L組GSH含量分彆為(0.17±0.0)、(0.20±0.04)、(0.07±0.03)μmol/μg pro,明顯低于對照組(0.30±0.01) μmol/L pro,差異有統計學意義(P＜0.05).2.50、5.00、10.00 μmol/L劑量組NF-kB p65錶達的蛋白條帶灰度值明顯高于對照組,差異有統計學意義(P＜0.05).結論 在本實驗條件下,TMT對PC12細胞具有明顯抑製增殖和誘導凋亡的作用,其作用可能與氧化應激以及NF-kB信號通路的激活有關.
목적 재체외조건하,연구삼갑기록화석(trimethyltin chloride,TMT)대PC12세포증식、세포조망급세포양화손상적작용,병탐토TMT대NF-kB표체적영향.방법 (1)불동농도TMT(0、0.3125、0.6250、1.2500、2.500、5.000、10.000、20.000 μmol/L)처리PC12세포24、48 h,새서람(MTT)법측정세포존활솔；(2)1.25、2.50、5.00、10.00 μmol/L TMT분별염독PC12세포12、24h후,류식세포의검측검측세포조망솔；(3)1.25、2.50、5.00、10.00 μmol/L제량적TMT염독PC12세포6h후,측정활성록(ROS)화곡광감태(GSH)함량적변화；(4)1.25、2.50、5.00、10.00 μmol/L제량적TMT염독PC12세포12h후면역인적법(Western blot)검측핵단백NF-kB적수평.결과 여용제대조조비교,염독24 h,2.5000、5.0000、10.0000、20.0000 μmol/L TMT제량조세포존활솔명현하강；염독48 h,1.2500、2.5000、5.0000、10.0000、20.0000 μmol/L제량조세포존활솔명현하강,차이균유통계학의의(P＜0.05).1.25、2.50、5.00、10.00 μmol/L TMT염독세포12h,조망솔분별위15.30％±0.75％、18.90％±0.61％、22.00％±0.60％、36.50％±0.66％,염독24 h조망솔분별위28.60％±0.40％、43.54％±2.00％、65.73％±0.71％、74.67％±0.40％,명현고우대조조[12 h:(12.80％±1.00％)、24 h:(16.83％±0.25％)],차이균유통계학의의(P＜0.05).1.25、2.50、5.00、10.00 μmol/L제량조적ROS형광강도치분별위대조조적1.42、1.71、1.78、1.89배,차이유통계학의의(P＜0.05).2.50、5.00、10.00 μmol/L조GSH함량분별위(0.17±0.0)、(0.20±0.04)、(0.07±0.03)μmol/μg pro,명현저우대조조(0.30±0.01) μmol/L pro,차이유통계학의의(P＜0.05).2.50、5.00、10.00 μmol/L제량조NF-kB p65표체적단백조대회도치명현고우대조조,차이유통계학의의(P＜0.05).결론 재본실험조건하,TMT대PC12세포구유명현억제증식화유도조망적작용,기작용가능여양화응격이급NF-kB신호통로적격활유관.
Objective To investigate the effects of trimethyltin chloride (TMT) on proliferation,apoptosis,oxidative damage,and NF-kB expression in PC12 cells in vitro.Methods PC12 cells were treated with 0,0.3125,0.6250,1.2500,2.5000,5.0000,10.0000,and 20.0000 μmol/L TMT for 24 and 48 h,and MTT assay was used to evaluate cell viability.PC12 cells were treated with 1.25,2.50,5.00,and 10.00 μmol/L TMT for 12 and 24 h,and flow cytometry was used to measure the apoptotic rates of cells.PC12 cells were treated with 1.25,2.50,5.00,and 10.00 μmol/L TMT for 6 h,and the reactive oxygen species (ROS) and glutathione (GSH) levels were measured.PC12 cells were treated with 1.25,2.50,5.00,and 10.00 μmol/L TMT for 12 h,and Western blot was used to measure NF-kB levels.Results Compared with solvent controls,the PC12 cells treated with 2.5000,5.0000,10.0000,and 20.0000 μ mol/L TMT for 24 h showed significantly decreased cell viability (P＜0.05); the PC12 cells treated with 1.2500,2.5000,5.0000,10.0000,and 20.0000 μmol/L TMT for 48 h showed significantly decreased cell viability (P＜0.05).The PC12 cells treated with 1.2500,2.5000,5.0000,and 10.0000 μmol/L TMT for 12 h had apoptotic rates of 15.30％±0.75％,18.90％±0.61％,22.00％±0.60％,and 36.50％±0.66％,respectively,and the PC12 cells treated with 1.25,2.50,5.00,and 10.00 μmol/L TMT for 24 h had apoptotic rates of 28.6％±0.40％,43.54％±2.00％,65.73％±0.71％,and 74.67％ ±0.40％,respectively,all significantly higher than those of the control group (12 h:12.80％±1.00％,24h:16.83％±0.25％)(P＜0.05).The ROS fluorescence intensities of the PC12 cells treated with 1.25,2.50,5.00,and 10.00 μmol/L TMT were 1.42,1.71,1.78,and 1.89 times that of the control group (P＜0.05); the PC12 cells treated with 2.50,5.00,and 10.00 μmol/L TMT had GSH levels of 0.17 ±0.0,0.20±0.04,and 0.07 ±0.03 μmol/μg protein,significantly lower than that of the control group (0.30±0.01 μmol/L protein) (P＜0.05).The PC 12 cells treated with 2.50,5.00,and 10.00 μmol/L TMT had significantly higher expression of NF-kB p65 than the control group (P＜0.05).Conclusion Under our laboratory conditions,TMT can significantly inhibit proliferation and induce apoptosis in PC12 cells,which may be related to oxidative stress and NF-kB signaling pathway activation.
