中华医学杂志
中華醫學雜誌
중화의학잡지
National Medical Journal of China
2013年
42期
3355-3359
,共5页
但超%祝恒成%刘修恒%姚启盛
但超%祝恆成%劉脩恆%姚啟盛
단초%축항성%류수항%요계성
RelB基因%RNA干扰%前列腺癌%放疗敏感性
RelB基因%RNA榦擾%前列腺癌%放療敏感性
RelB기인%RNA간우%전렬선암%방료민감성
目的 观察转染RelB小干扰RNA(RelB-siRNA)对小鼠前列腺癌细胞RM-1放射治疗敏感性的影响.方法 将RM-1细胞分为4组,分别为RelB-siRNA组、空载体组、未感染组和正常对照组,分别感染RelB-siRNA慢病毒载体、空载体病毒及不感染病毒,细胞感染成功后,前3组细胞接受X线照射,用细胞克隆方法检测0、2、4、6、8 Gy剂量照射后细胞存活分数和相关参数值;上述4组细胞用Annexin V/PI流式细胞仪检测6 Gy照射剂量下细胞凋亡率,实时PCR检测6 Gy照射剂量下细胞RelBmRNA表达,Western印迹检测6 Gy照射剂量下细胞质和细胞核中RelB蛋白的表达.结果 细胞克隆结果提示,RelB-siRNA组在每个剂量点所对应的存活分数均低于空载体组和未感染组,RelB-siRNA组的细胞平均致死剂量(D0值)、准域剂量(Dq值)、2Gy细胞存活分数(SF2值)分别为1.68、0.60、0.43,低于空载体组(1.92、3.08、0.89)和未感染组(1.93、2.76、0.84);Annexin V/PI流式细胞仪结果表明,RelB-siRNA组凋亡率为15.27%±1.62%,明显高于未感染组和空载体组的7.90%±1.50%、8.40%±0.69%(P<0.01),实时PCR结果显示,RelB-siRNA组的RelBmRNA的扩增倍数1.18±0.03,低于未感染组与空载体组2.10±0.61、1.97±0.66(P<0.01);Western印迹检测结果提示,细胞质RelB-siRNA组灰度比值为0.50±0.08,明显低于未感染组和空载体组的1.77±0.19、1.52±0.12(P<0.01);细胞质RelB-siRNA组灰度比值为0.18±0.03,明显低于未感染组和空载体组的0.61±0.12、0.54±0.13(P<0.01).细胞质RelB-siRNA对RelB蛋白抑制率为71.8%,细胞核RelB-siRNA对RelB蛋白抑制率为70.4%.结论 RelB-siRNA可有效抑制小鼠前列腺癌细胞RM-1中RelB表达,可明显增加RM-1对放射治疗的敏感性.
目的 觀察轉染RelB小榦擾RNA(RelB-siRNA)對小鼠前列腺癌細胞RM-1放射治療敏感性的影響.方法 將RM-1細胞分為4組,分彆為RelB-siRNA組、空載體組、未感染組和正常對照組,分彆感染RelB-siRNA慢病毒載體、空載體病毒及不感染病毒,細胞感染成功後,前3組細胞接受X線照射,用細胞剋隆方法檢測0、2、4、6、8 Gy劑量照射後細胞存活分數和相關參數值;上述4組細胞用Annexin V/PI流式細胞儀檢測6 Gy照射劑量下細胞凋亡率,實時PCR檢測6 Gy照射劑量下細胞RelBmRNA錶達,Western印跡檢測6 Gy照射劑量下細胞質和細胞覈中RelB蛋白的錶達.結果 細胞剋隆結果提示,RelB-siRNA組在每箇劑量點所對應的存活分數均低于空載體組和未感染組,RelB-siRNA組的細胞平均緻死劑量(D0值)、準域劑量(Dq值)、2Gy細胞存活分數(SF2值)分彆為1.68、0.60、0.43,低于空載體組(1.92、3.08、0.89)和未感染組(1.93、2.76、0.84);Annexin V/PI流式細胞儀結果錶明,RelB-siRNA組凋亡率為15.27%±1.62%,明顯高于未感染組和空載體組的7.90%±1.50%、8.40%±0.69%(P<0.01),實時PCR結果顯示,RelB-siRNA組的RelBmRNA的擴增倍數1.18±0.03,低于未感染組與空載體組2.10±0.61、1.97±0.66(P<0.01);Western印跡檢測結果提示,細胞質RelB-siRNA組灰度比值為0.50±0.08,明顯低于未感染組和空載體組的1.77±0.19、1.52±0.12(P<0.01);細胞質RelB-siRNA組灰度比值為0.18±0.03,明顯低于未感染組和空載體組的0.61±0.12、0.54±0.13(P<0.01).細胞質RelB-siRNA對RelB蛋白抑製率為71.8%,細胞覈RelB-siRNA對RelB蛋白抑製率為70.4%.結論 RelB-siRNA可有效抑製小鼠前列腺癌細胞RM-1中RelB錶達,可明顯增加RM-1對放射治療的敏感性.
목적 관찰전염RelB소간우RNA(RelB-siRNA)대소서전렬선암세포RM-1방사치료민감성적영향.방법 장RM-1세포분위4조,분별위RelB-siRNA조、공재체조、미감염조화정상대조조,분별감염RelB-siRNA만병독재체、공재체병독급불감염병독,세포감염성공후,전3조세포접수X선조사,용세포극륭방법검측0、2、4、6、8 Gy제량조사후세포존활분수화상관삼수치;상술4조세포용Annexin V/PI류식세포의검측6 Gy조사제량하세포조망솔,실시PCR검측6 Gy조사제량하세포RelBmRNA표체,Western인적검측6 Gy조사제량하세포질화세포핵중RelB단백적표체.결과 세포극륭결과제시,RelB-siRNA조재매개제량점소대응적존활분수균저우공재체조화미감염조,RelB-siRNA조적세포평균치사제량(D0치)、준역제량(Dq치)、2Gy세포존활분수(SF2치)분별위1.68、0.60、0.43,저우공재체조(1.92、3.08、0.89)화미감염조(1.93、2.76、0.84);Annexin V/PI류식세포의결과표명,RelB-siRNA조조망솔위15.27%±1.62%,명현고우미감염조화공재체조적7.90%±1.50%、8.40%±0.69%(P<0.01),실시PCR결과현시,RelB-siRNA조적RelBmRNA적확증배수1.18±0.03,저우미감염조여공재체조2.10±0.61、1.97±0.66(P<0.01);Western인적검측결과제시,세포질RelB-siRNA조회도비치위0.50±0.08,명현저우미감염조화공재체조적1.77±0.19、1.52±0.12(P<0.01);세포질RelB-siRNA조회도비치위0.18±0.03,명현저우미감염조화공재체조적0.61±0.12、0.54±0.13(P<0.01).세포질RelB-siRNA대RelB단백억제솔위71.8%,세포핵RelB-siRNA대RelB단백억제솔위70.4%.결론 RelB-siRNA가유효억제소서전렬선암세포RM-1중RelB표체,가명현증가RM-1대방사치료적민감성.
