中华医学杂志
中華醫學雜誌
중화의학잡지
National Medical Journal of China
2013年
45期
3632-3635
,共4页
俞云飞%徐宏光%王弘%张巍%熊寿良%张敏
俞雲飛%徐宏光%王弘%張巍%熊壽良%張敏
유운비%서굉광%왕홍%장외%웅수량%장민
椎间盘%软骨细胞%吞噬作用%物理刺激
椎間盤%軟骨細胞%吞噬作用%物理刺激
추간반%연골세포%탄서작용%물리자격
目的 观察不同月龄SD大鼠终板软骨中自噬的变化及其意义.方法 取3、6、12月龄SD大鼠的原代终板软骨细胞,分为自然培养组和雷帕霉素组.茜素红染色观察细胞形态,实时聚合酶链反应和免疫印迹检测软骨标志基因Ⅱ型胶原、SOX-9、蛋白多糖转录因子和基质分解酶相关基因MMP-13以及自噬相关基因Beclin-1和LC3基因的表达,单丹磺酰戊二胺(MDC)染色观察细胞的自噬率,四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测细胞存活率.结果 茜素红染色显示细胞呈梭形改变,蛋白多糖转录因子、Sox-9和Ⅱ型胶原基因表达呈年龄依赖性降低趋势(P<0.05),提示随年龄增长,终板软骨细胞出现退变;自噬相关基因Beclin-1和LC3在各组终板软骨细胞中均有表达,且呈年龄依赖性降低趋势[(1.0±0.1)比(0.6±0.1),(1.0±0.1)比(0.3±0.2);(1.0±0.2)比(0.4±0.1),(1.0±0.2)比(0.1±0.1)](P<0.05),自噬发生率也呈现明显降低(P<0.05).自然培养组中,细胞存活率呈逐渐降低趋势(P<0.05);与自然培养组相比,雷帕霉素组中各组细胞存活率明显增加(P<0.05).结论 自然增龄大鼠中,终板软骨细胞逐渐出现退变,且存活率降低;上调其自噬水平,可提高细胞存活率,提示呈年龄依赖性降低的自噬活性,可能与椎间盘的自然退变有关.
目的 觀察不同月齡SD大鼠終闆軟骨中自噬的變化及其意義.方法 取3、6、12月齡SD大鼠的原代終闆軟骨細胞,分為自然培養組和雷帕黴素組.茜素紅染色觀察細胞形態,實時聚閤酶鏈反應和免疫印跡檢測軟骨標誌基因Ⅱ型膠原、SOX-9、蛋白多糖轉錄因子和基質分解酶相關基因MMP-13以及自噬相關基因Beclin-1和LC3基因的錶達,單丹磺酰戊二胺(MDC)染色觀察細胞的自噬率,四甲基偶氮唑鹽(MTT)法檢測細胞存活率.結果 茜素紅染色顯示細胞呈梭形改變,蛋白多糖轉錄因子、Sox-9和Ⅱ型膠原基因錶達呈年齡依賴性降低趨勢(P<0.05),提示隨年齡增長,終闆軟骨細胞齣現退變;自噬相關基因Beclin-1和LC3在各組終闆軟骨細胞中均有錶達,且呈年齡依賴性降低趨勢[(1.0±0.1)比(0.6±0.1),(1.0±0.1)比(0.3±0.2);(1.0±0.2)比(0.4±0.1),(1.0±0.2)比(0.1±0.1)](P<0.05),自噬髮生率也呈現明顯降低(P<0.05).自然培養組中,細胞存活率呈逐漸降低趨勢(P<0.05);與自然培養組相比,雷帕黴素組中各組細胞存活率明顯增加(P<0.05).結論 自然增齡大鼠中,終闆軟骨細胞逐漸齣現退變,且存活率降低;上調其自噬水平,可提高細胞存活率,提示呈年齡依賴性降低的自噬活性,可能與椎間盤的自然退變有關.
목적 관찰불동월령SD대서종판연골중자서적변화급기의의.방법 취3、6、12월령SD대서적원대종판연골세포,분위자연배양조화뢰파매소조.천소홍염색관찰세포형태,실시취합매련반응화면역인적검측연골표지기인Ⅱ형효원、SOX-9、단백다당전록인자화기질분해매상관기인MMP-13이급자서상관기인Beclin-1화LC3기인적표체,단단광선무이알(MDC)염색관찰세포적자서솔,사갑기우담서염(MTT)법검측세포존활솔.결과 천소홍염색현시세포정사형개변,단백다당전록인자、Sox-9화Ⅱ형효원기인표체정년령의뢰성강저추세(P<0.05),제시수년령증장,종판연골세포출현퇴변;자서상관기인Beclin-1화LC3재각조종판연골세포중균유표체,차정년령의뢰성강저추세[(1.0±0.1)비(0.6±0.1),(1.0±0.1)비(0.3±0.2);(1.0±0.2)비(0.4±0.1),(1.0±0.2)비(0.1±0.1)](P<0.05),자서발생솔야정현명현강저(P<0.05).자연배양조중,세포존활솔정축점강저추세(P<0.05);여자연배양조상비,뢰파매소조중각조세포존활솔명현증가(P<0.05).결론 자연증령대서중,종판연골세포축점출현퇴변,차존활솔강저;상조기자서수평,가제고세포존활솔,제시정년령의뢰성강저적자서활성,가능여추간반적자연퇴변유관.
