CAJ | 학술논문

目的研究Klotho基因转导对自发性高血压大鼠(spontaneous hypertensive rat,SHR)高血压进程及心脏损害的影响及可能机制.方法应用含有小鼠全长Klotho cDNA的重组腺相关病毒(rAAV.mKL)载体基因转导作为干预方法.实验分4组:实验组(A、B、C 3组)均为SHR,对照组(D组)为年龄、性别匹配的SD大鼠,每组5只;其中A、B、C组SHR分别尾静脉注射等体积含单纯磷酸盐缓冲液(空A组)、rAAV.mKL及腺相关病毒载体介导的增强绿色荧光蛋白(rAAV.EGFP),对照组SD大鼠也注射等体积磷酸盐缓冲液,实验观察12周.实验结束时,测血浆血糖,酶联免疫吸附剂测定法测胰岛素、胰岛素样生长因子-1(insulin-likegrowthfactor-1,IGF-1)蛋白水平;心脏称重计算心脏体重指数;荧光显微镜检测心脏冰冻切片EGFP荧光;逆转录PCR、免疫组化、Western印迹检测心脏组织Klotho、IGF-1、IGF-1受体(IGF-1 receptor,IGF-1R)mRNA及蛋白表达以及磷酸化Akt蛋白表达.HE及Masson染色后观察肥大心肌及胶原纤维.结果发现rAAV.mKL转导SHR后能阻止其血压进一步升高,而其他两组SHR的血压则继续升高.与SHR对照组相比,rAAV.mKL转导组其心脏组织Klotho mRNA及蛋白表达上调,其血浆血糖、IGF-1水平升高,心肌磷酸化Akt蛋白降低;同时其心肌肥大、胶原纤维增生较SHR对照组明显减轻.结论 Klotho基因转导可以阻止自发性高血压进程,也可以阻止心肌肥大及胶原纤维增生.保护心脏机制可能与胰岛素、IGF-1信号通路受到抑制有关,即通过抑制下游Akt磷酸化而实现.
목적 연구Klotho기인전도대자발성고혈압대서(spontaneous hypertensive rat,SHR)고혈압진정급심장손해적영향급가능궤제.방법 응용함유소서전장Klotho cDNA적중조선상관병독(rAAV.mKL)재체기인전도작위간예방법.실험분4조:실험조(A、B、C 3조)균위SHR,대조조(D조)위년령、성별필배적SD대서,매조5지;기중A、B、C조SHR분별미정맥주사등체적함단순린산염완충액(공A조)、rAAV.mKL급선상관병독재체개도적증강록색형광단백(rAAV.EGFP),대조조SD대서야주사등체적린산염완충액,실험관찰12주.실험결속시,측혈장혈당,매련면역흡부제측정법측이도소、이도소양생장인자-1(insulin-likegrowthfactor-1,IGF-1)단백수평;심장칭중계산심장체중지수;형광현미경검측심장빙동절편EGFP형광;역전록PCR、면역조화、Western인적검측심장조직Klotho、IGF-1、IGF-1수체(IGF-1 receptor,IGF-1R)mRNA급단백표체이급린산화Akt단백표체.HE급Masson염색후관찰비대심기급효원섬유.결과 발현rAAV.mKL전도SHR후능조지기혈압진일보승고,이기타량조SHR적혈압칙계속승고.여SHR대조조상비,rAAV.mKL전도조기심장조직Klotho mRNA급단백표체상조,기혈장혈당、IGF-1수평승고,심기린산화Akt단백강저;동시기심기비대、효원섬유증생교SHR대조조명현감경.결론 Klotho기인전도가이조지자발성고혈압진정,야가이조지심기비대급효원섬유증생.보호심장궤제가능여이도소、IGF-1신호통로수도억제유관,즉통과억제하유Akt린산화이실현.